目的: 研究多靶位、多色荧光原位杂交技术在尿路上皮肿瘤中检测的敏感性和特异性，探讨多靶位、多色荧光原位杂交技术在尿路上皮肿瘤中的诊断，并评估是否具有较好的临床应用价值。 材料和方法: 本研究选取了2008年4月至2009年3月之间，尿路上皮肿瘤患者68例，平均年龄71．6±11．6岁，收集清晨首次尿液66份，膀胱冲洗液14份，共80份样本：非尿路上皮肿瘤48例做为对照组，平均年龄67．7±13．7岁，共收集清晨首次尿液样本48份。全部样本均经过多靶位、多色荧光原位杂交技术判别，依据荧光显微镜下观察到的染色体异常变化为标准，对样本检测为阳性或阴性。结果数据采用SPSS for windows 13统计分析软件进行分析，分别在两组之间采用卡方检验和独立样本t检验进行检验。P<0． 05有统计学意义。 结果: 多靶位、多色荧光原位杂交技术在128份样本中有73份出现阳性表达，其中71份阳性表达在尿路上皮肿瘤组，敏感性为88．8％，对照组仅有2例阳性表达，特异性为95．8％。统计学计算结果X2=87．584，P=0，显示有显著差异。在尿路上皮肿瘤组中，Ta期的阳性表达最小，仅为61．5％，T1期表达为88．9％、T4期及Tis期的表达是100％，非浸润性UC（Ti8、Ta）和浸润性UC（T1-4）之间比较，结果X2=9．017，P=0．003，有显著差异。同时，在高分化癌细胞G1级阳性表达为75％，中、低分化的G2级、G3级阳性表达分别为90．9％和97．1％，进行G1期和G2、G3期之间分析，X2=6．492，P=0．011，表明有统计学意义。此外，清晨首次尿液的总体阳性表达为86．4％，膀胱冲洗的阳性表达为100％，两者比较X2=2．151，P=0．142，没有统计学意义。 结论: 多靶位、多色荧光原位杂交技术是敏感、无创的诊断尿路上皮肿瘤的检测方式。它在检验浸润性尿路上皮肿瘤（T1-4）的较之非浸润性肿瘤（Tis、Ta）更加具有优势，同时在检验中、高级别的尿路上皮肿瘤上较之低级别肿瘤有明显的高检出率。此外，本研究中膀胱冲洗和首次晨尿样本之间阳性检出率无可比性。