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目的:1.研究重组人粒细胞集落刺激因子(Rh G-CSF)对人类正常乳腺细胞株MCF-10A和乳腺癌细胞株SK-BR-3增殖作用的影响。2.探讨Rh G-CSF对乳腺癌模型MMTV-erb B2转基因鼠乳腺发育的影响。方法:1.体外培养人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A和乳腺癌细胞株SKBR-3细胞株,将含不同浓度的Rh G-CSF的培养液与MCF-10A和SK-BR-3共同培养不同时间,然后利用MTT法,研究Rh G-CSF对人乳腺正常细胞MCF-10A和乳腺癌细胞株SK-BR-3增殖率的影响。2.选择鼠龄12周的健康雌性MMTV-er Bb2转基因鼠60只,随机分为三组,分别为低剂量组:Rh G-CSF药物小鼠皮下注射(剂量为0.125μg,每日一次);高剂量组:Rh G-CSF药物小鼠皮下注射(剂量为0.25μg,每日一次);对照组:生理盐水小鼠皮下注射(剂量为0.25μg,每日一次)。Rh G-CSF药物皮下注射8周后,每组取6只小鼠解剖,取小鼠腹部左下侧完整乳腺组织行Whole mount染色,观察小鼠乳腺大体形态结构的变化,然后应用HE染色法观察小鼠乳腺导管结构发育情况,用免疫组织化学染色SP法检测各组小鼠乳腺组织内PCNA蛋白表达情况,用实时定量PCR(Real Time-PCR)法,检测cyclin D1、c-myc、VEGF、G-CSF3R在各组小鼠乳腺组织中的表达。结果:1.经不同浓度的Rh G-CSF药物处理细胞后,高低剂量的Rh G-CSF药物对人类正常乳腺细胞MCF-10A的增殖作用均不明显,而与对照组相比,乳腺癌细胞株SK-BR-3在低剂量时细胞增殖作用明显。2.Whole mount结果显示,用药8周后,小鼠乳腺形态以对照组为参考,低剂量组乳腺小叶发育旺盛,小鼠乳腺导管数目增多(P=0.000),而高剂量组小鼠乳腺导管增殖民作用不明显(P=0.027)。3.各组小鼠乳腺组织内增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen PCNA)与对照组相比,低剂量组PCNA高表达(P=0.000),高剂量组PCNA阳性不明显(P=0.004),Real Time-PCR结果显示细胞增殖基因和相关通路因子如cyclin D1、c-myc、VEGF、G-CSF3R的m RNA表达水平在乳腺组织中与对照组相比,低剂量时高表达,高剂量时作用不明显(P<0.05)。结论:1.Rh G-CSF对人类正常乳腺细胞MCF-10A的增殖作用不明显,对乳腺癌细胞株SK-BR-3低剂量时具有增殖作用。2.Rh G-CSF对MMTV-erb B2转基因鼠乳腺发育具有影响,在低剂量明显促进小鼠乳腺发育,而高剂量时乳腺发育增殖作用不明显。