背景：　　1885年，在德国Sachsen地区Borna镇流行一种造成大量军马死亡的疾病，命名为Borna病(Borna disease, BD)。经证明Borna病是由一种嗜神经病毒感染造成，这种病毒称为Borna病病毒(Borna disease virus, BDV)。BDV可以感染各种脊椎动物，也包括所有温血动物。BDV持续感染许多动物物种的中枢神经系统并导致行为障碍，如焦虑、攻击、多动、异常行为和认知缺陷。近20年在对精神患者（尤其是精神分裂症、抑郁症和双相情感障碍）的大量流行病学研究中发现，部分精神患者的脑脊液和血液中能检测到BDV的抗体和核酸，预测与人类精神疾病有关。　　BDV自然可导致严重的免疫介导的神经疾病如爆发性脑炎。但是，在实验室新生大鼠感染脑炎症状不明显，在不引起神经细胞破坏及中枢神经系统炎症的情况却导致宿主（大鼠）行为学异常和学习认知功能障碍。BDV如何感染以及如何致病仍然不清楚，特别是BDV在宿主的作用起始靶点。目前文献对BDV的磷蛋白质（P）、核蛋白质(N)、糖蛋白质(G)、非糖基化蛋白质（X）作用机制都有研究，其中P蛋白质和N蛋白质在发病机制中起主要作用，也是目前研究最多的，特别对P蛋白质的研究尤为关注。　　目的：　　本实验针对于BDV的P(P24)质粒和N(P40)质粒构建慢病毒载体，并利用慢病毒载体感染原代神经元，筛选出与BDV-P/N蛋白质结合的差异蛋白质，以期进一步找出与BDV-P/N蛋白质结合的关键宿主蛋白质，并探索其致病作用。　　方法：　　1.扩增pEGFP-N1-P24和pEGFP-N1-P40质粒（实验室保存）并测序，用于后续慢病毒包装。　　2.进行慢病毒包装及滴度测定，并感染原代海马神经元， Western-blot方法检测P24和P40是否表达。　　3.提取慢病毒感染胎鼠海马的蛋白质做免疫共沉淀实验，实验分为BDV-P(P24)组，BDV-N(P40)组，NC组；抗体分别用P24抗体，P40抗体，兔IgG抗体；免疫共沉淀复合物做LC-MS/MS质谱分析。　　4.质谱鉴定蛋白质复合物成分的结果，与对照组比对得出差异蛋白质，进行生物信息学分析对差异蛋白质进行预测。　　5.对上述预测差异蛋白质进行验证。　　结果：　　1.质粒扩增后测序序列正确并成功转染 SH-SY5Y细胞， Western-Bolt验证P24和P40蛋白质正常表达。　　2.过表达慢病毒载体构建成功，并测定滴度为1×109 TU/ml，能成功感染原代细胞并表达BDV-P（P24）和BDV-N（P40）。　　3.免疫共沉淀复合物质谱分析结果后得到差异蛋白质，用venny分析筛选到453个与BDV-P相互作用的候选蛋白质,；筛选到259个与BDV-N相互作用的候选蛋白质。　　4.进行GO，KEGG和PPI网络注释以探索这些蛋白质之间的作用。根据生物信息学的分析，预测酰基辅酶A结合蛋白质（ACBP，又名安定受体抑制肽DBI）与BDV-P结合，RT-qPCR实验将ACBP（DBI）及涉及的GABA-α1、GABA-α2、GABA-α3进一步验证，ACBP（DBI）、GABA-α1、GABA-α2上调（ P＜0.05）， GABA-α3没有显著性差异（P＞0.05）。　　结论：　　1.本实验成功构建BDV-P（P24）和BDV-N（P40）的过表达慢病毒载体，并能成功感染细胞，为BDV的基础研究提供了更有力的技术方法。　　2.免疫共沉淀得到的差异蛋白质结果可做后续实验分析，我们筛选到了453个与BDV-P相互作用和259个与BDV-N相互作用的候选蛋白质，这些数据为深入研究BDV-P/N与宿主结合致病机制和作用方式提供了线索。以期能筛查出BDV与人类精神疾病发生联系的蛋白质，进一步探讨BDV的发病机制。　　3.在PPI分析中，提取部分相关蛋白质之间的连接用于进一步的相关分析。我们推测ACBP（DBI）与BDV-P结合，可能参与BDV感染宿主后致焦虑的过程。　　4.另外结合生物信息学的分析和文献的报道，我们推测，第一：BDV-P蛋白质参与组胺H1/H2受体介导的信号传导途径，可能是BDV感染后焦虑和记忆损伤的关键。第二，BDV-P蛋白质的Slit/Robo轴突导向分子与肿瘤的关系，感染BDV后可能会抑制胶质瘤侵袭。