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微生物菌种在发酵工业中至关重要,也有“发酵工业的灵魂”之称,因此,加强高产菌种的特性研究十分重要。高山被孢霉(Mortierella alpina,MA)被广泛应用于工业化生产具有重要生理活性的花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)。本文围绕花生四烯酸产生菌-高山被孢霉进行研究,全面比较AA含量不同的几株产生菌的特点,从而发现花生四烯酸高产菌株的显著特点,以期为进一步选育获得新的高产菌株、优化发酵工艺,以及确定高产菌株保藏方法等方面提供全面的指导。通过比较研究,获得主要研究结果如下: (1)分离筛选了4株AA含量明显不同的高山被孢霉菌株M30、M32、M44、M45。在相同培养条件下,4株菌的AA含量差别明显分别为51%、41%、36%、16%,为比较分析AA高产菌株的特性提供了良好的实验材料。 (2)比较分析了不同AA含量菌株的生长特性,发现AA高产菌株具有如下特点:相对AA产量低的菌株而言,AA高产菌株的单孢株在固体培养中生长速度平缓并生成大量孢子,液体发酵时AA高产菌株对葡萄糖转化率高、需求量相对较低。 (3)比较分析了不同AA含量菌株的油脂组分及含量,发现4株菌所合成的油脂组分完全一致,但组分的含量各不相同,其中尤以油酸(Oleic acid, OA)和AA含量的差别显著,且二者呈反比例关系。通过进一步分析4株菌的转化油酸所需的Δ12去饱和酶的基因表达量,发现AA含量低的菌株其Δ12去饱和酶基因表达量也低。因此,Δ12去饱和酶基因高表达可能是AA高产菌株的优良特性。 (4)比较分析了不同AA含量菌株发酵终点时基因组DNA的甲基化水平,结果发现,4株菌的AA含量虽差别较大但基因组DNA甲基化修饰水平基本一致。表明AA高产菌株与AA低产菌株之间的DNA甲基化修饰水平并无显著不同。