前言老年性痴呆亦称阿尔茨海默病,是一种伴有脑特征病理及生化变化的认知功能障碍临床综合症。AD常发生于老年人群,目前已成为继心脏病、肿瘤和中风之后的第四位死亡原因。AD的病理特征主要为老年斑、神经元纤维缠结和基底前脑胆碱能神经元丢失,其中老年斑的主要成分为β淀粉样蛋白。虽然AD的病因还不是很清楚,很多学者认为Aβ的沉积是AD的始发因素。因此,针对Aβ的治疗措施将成为一种很有潜力的治疗方法。血脑屏障阻止了大多数外源性大分子物质从血液循环进入脑实质。经鼻腔通路递送途径是一种新的中枢神经系统给药方法,可避开BBB,将药物直接送入CNS,并且具有给药相对方便、无创伤性的特点,近年来已经引起神经科学领域许多学者的关注。本实验采用经鼻腔给药的方法,应用抗Aβ抗体治疗AD大鼠,试图证实抗Aβ抗体可经该途径进入脑内,来确定该途径递送抗Aβ抗体治疗老年性痴呆的可行性和可靠性。实验方法1、实验动物和分组:健康雄性SD大鼠15只,随机分为对照组、AD模型组及治疗组3组,每组5只大鼠。2、建立AD动物模型:造模前将Aβ配成2μg/μl的溶液,37℃孵育1周,使其变为聚集状态的Aβ。采用立体定位技术于大鼠双侧海马区注射聚集状态的Aβ,对照组注射生理盐水。3天后进行水迷宫试验,逃避潜伏期明显延长者为造模成功。3、经鼻给药方法:造模3天后开始经鼻腔给药,每日给药一次,连续给药7天。治疗组和对照组给予辣根过氧化物酶标记的抗Aβ抗体,AD模型组给予生理盐水。4、水迷宫试验:采用水迷宫实验进行行为学检测,大鼠在造模前训练三天,根据第3天成绩剔除差异明显者。造模3天后进行水迷宫试验,检测造模是否成功,10天后再次进行水迷宫试验,检测治疗效果。5、免疫组化法检测Aβ蛋白:采用免疫组化法检测Aβ蛋白的沉积情况。显微图像分析系统采集图像,细胞浆中呈棕黄色颗粒者为阳性细胞,分析海马部位阳性细胞面积百分比。6、统计学处理:各组数据均以(?)±s表示,采用SPSS 13.0统计软件进行方差分析及t检验,P＜0.05为差异具有统计学意义。实验结果1、水迷宫试验结果:造模前各组大鼠水迷宫逃避潜伏期无明显差异(P＞0.05);造模3天后,AD模型组和治疗组逃避潜伏期均较对照组明显延长(P＜0.05);造模10天后,AD模型组和治疗组逃避潜伏期均明显长于对照组(P＜0.05),且治疗组逃避潜伏期明显短于AD模型组(P＜0.05)。2、Aβ在脑内沉积情况:对照组海马区未见Aβ沉积。AD模型组和治疗组海马区可见大量Aβ沉积,治疗组阳性细胞显著少于AD模型组(P＜0.05)。结论1、经鼻腔给予的抗Aβ抗体可避开血脑屏障达到脑内,分布于皮质、海马及丘脑等处。2、抗Aβ抗体可改善AD大鼠认知障碍,减少脑内Aβ的沉积。