液相色谱中,固定相和流动相是两个很重要的因素,其中固定相不仅决定了色谱保留模式,而且也决定着溶质在色谱中的保留行为,所以研究固定相对溶质保留行为的影响具有重要意义,本文用计量置换保留理论来研究固定相对溶质保留及蛋白复性的影响,还研究了弱阳离子交换色谱法对还原变性溶菌酶复性的条件。 论文包括以下五个部分: 1.文献综述:组分在液相色谱（LC）中保留机理的研究是研究分离和纯化的理论基础,也一直是色谱研究中的热点,它对实际中的蛋白质分离纯化以及复性都具有指导意义。本章对色谱中的保留机理及理论、蛋白质液相色谱复性机理及蛋白折叠动力学理论模型研究进展进行了综述,共包括文献61篇。 2.详细论述了计量置换保留理论（stoichiometric displacement theory for retention,SDT-R）,以及SDT-R中各参数所表示的物理意义和在疏水色谱中各参数的测定方法。 3.通过对基质和端基均相同但有和无分子臂的两根疏水柱对7种天然蛋白质和三种芳香醇同系物的保留及其对SDT-R中的四组线性参数logI（1mol溶质对固定相的吸附势）、Z（1mol溶剂化溶质分子被溶剂化吸附剂吸附时,在溶剂化溶质与溶剂化固定相接触表面的两侧释放出溶剂的摩尔总数）、j（一个与1mol溶剂对固定相亲合势有关的常数）和logφ（柱相比对数）进行测定的结果进行了比较,考察分子臂对溶质保留的影响,结果表明,蛋白质分子非极性和极性氨基酸残基与非极性和极性配基（包括分子臂在内）之间的相互作用,会增加蛋白质与固定相之间的相互作用力。 4.用两根不同的DIOL疏水柱复性溶菌酶和rhINF-γ,由于亲水性分子臂的影响,实验测得无分子臂的DIOL-2柱比DIOL-1柱复性溶菌酶的质量回收率和活性回收率都要高;复性γ-干扰素也是DIOL-2柱的质量回收率和比活较高。 5.用弱阳离子交换色谱复性还原变性溶菌酶,筛选出最佳的复性溶菌酶时流动相中的脲浓度为4mol·L^-1Urea,pH值为8.0,GSH/GSSG比例为5∶1,复性时间为