DADS拮抗SRC通路对DJ-1核内高表达HL-60细胞侵袭迁移的影响

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[目的]研究二烯丙基二硫(DADS)对DJ-1核内高表达人白血病HL-60细胞侵袭迁移影响的作用机制,为白血病治疗的发展提供更完善的分子机制,为白血病患者找出更多的有效药物。[方法]通过Western blot检测DADS对DJ-1核内高表达HL-60细胞DJ-1表达的影响,以及DADS对DJ-1核内高表达HL-60细胞Src通路的影响。随后,再通过Western blot检测DADS及Src抑制剂对DJ-1核内高表达HL-60细胞Src通路的影响,以及DADS与Src抑制剂联合作用下对DJ-1表达的影响。应用Transwell迁移侵袭小室实验分别观察DADS及Src抑制剂对DJ-1核内高表达HL-60细胞增殖、侵袭迁移的影响。针对实验所需,实验分三组:对照组(HL-60细胞)、空载体组及高表达组(DJ-1核内高表达HL-60细胞)。[结果]Western blot结果显示,DADS处理后的DJ-1核内高表达HL-60细胞24h、48h、72h后,DJ-1蛋白表达水平表现为时间依赖性的下降(P<0.05)。经DADS处理后,对照组、空载体组、高表达细胞p-Src、p-Fak的蛋白表达水平较未处理的各组均显著下降(P<0.05),三组细胞的Src、Fak、Integrin的总蛋白表达水平没有显著变化。随后的Western blot结果显示,DADS及Src抑制剂处理后,对照组、空载体组、高表达组细胞的p-Src、p-Fak的蛋白表达水平较未处理的各组均显著下降(P<0.05),而三组细胞Src、Fak、Integrin的总蛋白表达水平亦没有显著变化。二者联合处理DJ-1核内高表达HL-60细胞24h、48h、72h后,DJ-1蛋白水平表现为时间依赖性的下降(P<0.05)。Transwell迁移和侵袭实验结果显示,DADS、Src抑制剂单独以及联合处理对照组与高表达组细胞后,DADS与抑制剂均可以抑制细胞侵袭迁移能力(P<0.05),且经二者联合处理后的细胞侵袭迁移抑制作用更显著(P<0.05)。[结论]:1.DADS可通过拮抗Src信号通路,下调DJ-1,抑制白血病细胞侵袭与迁移。2.Src抑制剂也具有抑制白血病细胞侵袭迁移的作用,且Src抑制剂可以增强DADS抗肿瘤的效应。
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