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目的:探讨人涎腺腺样囊性癌SACC-83细胞在常氧和低氧环境中缺氧诱导因子HIF-1α表达及细胞生物学行为的变化,沉默HIF-1α对低氧环境中的SACC-83细胞生长、迁移和侵袭能力的影响及对血管生成的影响和机制。方法:1、shRNA-HIF-1α质粒转染SACC-83细胞,经G418筛选和挑取阳性集落细胞扩增培养,Western blot鉴定沉默效率。2、Western blot、双抗体夹心ELISA法检测SACC-83细胞在常氧(21%O2)和低氧(5%O2)环境中HIF-1α、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达水平的差异及血管内皮生长因子(VEGF)的分泌情况;沉默HIF-1α对低氧(5%O2)环境中SACC-83细胞MMP-2蛋白表达及VEGF分泌的影响。3、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)体外三维培养法分析常氧(21%O2)和低氧(5%O2)环境中培养的SACC-83细胞分泌物促血管形成能力的差别以及沉默HIF-1α对低氧(5%O2)环境中SACC-83细胞分泌物促血管形成能力的影响。4、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验观察SACC-83细胞在常氧(21%O2)和低氧(5%O2)环境中的迁移、侵袭能力以及沉默HIF-1α对低氧(5%O2)环境中SACC-83细胞的迁移、侵袭能力的影响。5、MTT比色法、流式细胞分析法检测SACC-83细胞在常氧(21%O2)和低氧(5%O2)环境中增殖、凋亡和细胞周期的变化情况以及沉默HIF-1α对低氧(5%O2)环境中SACC-83细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。结果:1、成功构建HIF-1α低表达的稳定细胞株(SACC-83/shHIF-1α)。2、Western blot和ELISA结果显示,SACC-83细胞在低氧环境下HIF-1α、MMP-2蛋白表达水平及培养上清VEGF分泌明显增加(P<0.01),促血管形成能力提高(P<0.05),细胞迁移(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05)更强,但细胞增殖、凋亡和周期分布的变化没有统计学差异(P>0.05)。3、在低氧环境中,SACC-83/shHIF-1α细胞MMP-2蛋白、培养上清中VEGF蛋白含量均降低(P<0.01),促血管形成能力明显下降(P<0.01),细胞增殖、迁移和侵袭能力显著变弱(P<0.01),凋亡细胞比例增高(P<0.05),但细胞周期分布无明显差异(P>0.05)。结论:低氧环境促进SACC-83细胞中HIF-1α、MMP-2蛋白过表达,VEGF分泌增多,并且细胞侵袭、迁移能力及促血管形成能力增强,但增殖、凋亡和细胞周期无明显变化。沉默HIF-1α可以降低SACC-83细胞在低氧环境中MMP-2蛋白的表达,减少VEGF分泌,同时减弱细胞增殖、侵袭和迁移能力,增加细胞凋亡,但细胞周期变化不明显。