一株具有拮抗作用酵母的筛选及应用

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水果采后病害在水果运输和贮藏过程中造成了巨大的损失。化学杀菌剂处理是目前主要的处理手段。然而,未来的发展趋势是应用更安全和环境友好型的防腐剂来控制水果采后病害。众多生物防治方法中,利用具有拮抗活性的酵母菌种开展生物防治越来越受人们关注。研究微生物杀菌剂取代化学杀菌剂进行果蔬采后病害的防治,对减少食品中农药的残留,保护环境,保证食品安全具有重要意义。筛选具有拮抗活性的微生物是开发微生物杀菌剂的第一步,能否筛选到拮抗性能优良的菌种对于微生物杀菌剂防治水果病害的效果具有非常重要的作用。   本论文从果园土壤中筛选分离到一株对水果采后病害具有较高抑制作用的酵母菌,经鉴定为Pichia caribbica,中文名为卡利比克毕赤酵母:对卡利比克毕赤酵母的生长性能、菌体生长动力学特性、安全性能进行了研究:研究了卡利比克毕赤酵母对草莓采后主要致病菌及自然腐烂的抑制效果及对草莓贮藏后品质的影响;对卡利比克毕赤酵母制剂的后加工工艺进行了初步探讨。其主要研究结果如下:   (1)在果园土壤中通过挑选优势菌群分离到一株对梨果采后病害具有拮抗作用的酵母菌,经分子生物学、形态学特征鉴定和生理学特性鉴定,该菌株是卡利比克毕赤酵母(Pichia caribbica)。   (2)对卡利比克毕赤酵母的生长曲线进行了测定,发现在NYDB培养基中28℃下培养时,卡利比克毕赤酵母的生长速度很快,接种后几乎没有明显的延滞期,而足直接进入对数生长期,到第20时,酵母细胞数目达到最高值。对卡利比克毕赤酵母活菌制剂进行了小鼠经口灌胃急性毒性试验,证实该制剂属于实际无毒类。   (3)用卡利比克毕赤酵母对引起草莓采后腐烂的主要致病菌(草莓上由灰葡萄孢引起的灰霉病和由匍枝根霉引起的根腐病)进行了防治试验,证实该菌株对上述病害具有明显的抑制作用,同时菌体浓度显著地影响卡利比克毕赤酵母对草莓采后腐烂的抑制效果:菌体浓度越高,抑菌效果越好。卡利比克酵母对草莓整果贮藏时自然霉变的发生有显著的抑制作用。经卡利比克毕赤酵母处理的草莓,其贮藏期间的品质指标与对照草莓相比,没有明显的差异。说明卡利比克毕赤酵母处理不会对水果的贮藏品质产生不良的影响。   (4)对卡利比克毕赤酵母液体保藏制剂的研究表明,利用磷酸缓冲溶液添加2%海藻糖制备的菌悬液在25℃保藏15天仍然保持81.8%存活率;利用微波真空干燥技术在真空度8kPa,功率先为200W,后为100W,再进行真空干燥,得到含水量9.4%的活性干酵母,其活细胞率为100%。
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