论文部分内容阅读
本文以光皮桦茎叶组织为材料,构建了cDNA文库。初级文库滴度为1.5x106pfu·mL-1,重组率达97.3%,插入片段大小在0.5~3.0kb之间,平均长度约为1.3kb,表明所构建的文库质量较高,可用于后续基因克隆及表达的研究。从文库中随机挑取270个克隆测序获得224条有效序列,拼接出160个假定独立转录本(TUT),冗余度为28.6%。从Blast比对结果中推测出76条已知功能的基因或具推测功能的基因,将其大致分为9类,其中与代谢有关的unigenes占25%。这为我们研究光皮桦材性分子机制提供了基础。从cDNA文库中分离出三个蔗糖合成酶(SuSy)基因,其中SuSy1全长2937bp,开放阅读框为2436bp。SuSy2全长为2870bp,开放阅读框为2424bp。SuSy3全长为2589bp,开放阅读框为2118bp。通过定量PCR对SuSy基因分析,结果显示SuSy1主要在根中表达;SuSy2主要在茎中表达;SuSy3主要在叶中表达。表明SuSy2可能与光皮桦木质部的形成有关,SuSy1和SuSy3可能参于植物纤维素的合成。从cDNA文库中分离出三个S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)基因,其中SAMS1全长为1631bp,开放阅读框为1011bp。SAMS2全长为1608bp,开放阅读框为1248bp。SAMS3全长为1240bp,开放阅读框为1173bp。通过定量PCR对SAMS基因分析,结果显示SAMS1主要在叶中表达量,SAMS2和SAMS3主要在茎中表达量。且随着木质化程度的加深,SAMS基因均有先上升再下降的趋势。表明SAMS2和SAMS3可能与光皮桦木质素的合成有关。