【摘 要】
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本实验以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,优化rAAV-2对结肠上皮细胞的转导条件,在荧光显微镜下观察GFP的表达,计算转染率。而后予rAAV-2/hFⅨ感染人/鼠结肠上皮细胞,PCR法检测r
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本实验以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,优化rAAV-2对结肠上皮细胞的转导条件,在荧光显微镜下观察GFP的表达,计算转染率。而后予rAAV-2/hFⅨ感染人/鼠结肠上皮细胞,PCR法检测rAAV-2/hFIX转导细胞中hFIX基因的表达,ELISA试剂盒检测FIX:Ag量,一期法检测hFIX活性。从而为血友病B进一步的动物实验和临床基因治疗奠定基础。研究结论:rAAV-2/GFP能有效地转导SW480/C26细胞,丁酸钠能刺激增强转导效率,提高检测的灵敏度。rAAV-2/hFIX能有效地转导SW480/C26细胞并表达具有凝血活性的功能蛋白hFIX。
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