【摘 要】
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[目的]研究蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)活化对体外血小板聚集功能的影响。[方法]收集健康成年人外周血获取洗涤血小板;采用PKA活化剂Forskolin体外处理洗涤血小板;利用血小板刺激剂U46619,胶原(Collagen),凝血酶(Thrombin),瑞斯托霉素(Ristocetin)和二磷酸腺苷(ADP)使得血小板发生聚集;利用聚集仪测得血小板聚集情况,利用Weste
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[目的]研究蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)活化对体外血小板聚集功能的影响。[方法]收集健康成年人外周血获取洗涤血小板;采用PKA活化剂Forskolin体外处理洗涤血小板;利用血小板刺激剂U46619,胶原(Collagen),凝血酶(Thrombin),瑞斯托霉素(Ristocetin)和二磷酸腺苷(ADP)使得血小板发生聚集;利用聚集仪测得血小板聚集情况,利用Western blot检测血小板PKA的磷酸化底物GP Ⅰ bβ磷酸化(GP Ⅰ bβ166丝氨酸位点)表达水平,利用ELISA检测血小板总PKA活性。[结果]与对照组DMSO相比较,U46619、胶原(Collagen)、瑞斯托霉素(Ristocetin)、二磷酸腺苷(ADP)四者刺激血小板后,蛋白激酶A的活性均显著提高。而凝血酶(Thrombin)刺激血小板后,蛋白激酶A的活性显著下降(p<0.05);与对照组DMSO 相比较,5 μmol/L 的 Forskolin 可显著抑制 U46619、ADP 和 Collagen 诱导的血小板聚集(p<0.001);对Thrombin诱导的血小板聚集也具有一定抑制作用(p<0.05)。2.5 μmol/L 的 Forskolin 能显著抑制 U46619、胶原(Collagen)诱导的血小板聚集(p<0.001);而对ADP诱导的血小板聚集也具有一定抑制作用(p<0.05),对凝血酶(Thrombin)诱导的血小板聚集无明显抑制作用(p>0.05)。而2.5-10 μmol/L的Forskolin对Ristocetin诱导的血小板聚集无明显抑制作用(p>0.05)。10 μmolL的 Forskolin 对 U46619、胶原(Collagen)、凝血酶(Thrombin)和二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集也具有显著抑制作用(p<0.001)。[结论]蛋白激酶 A(ProteinkinaseA,PKA)参与诱导剂 U46619,胶原(Collagen),凝血酶(Thrombin),二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集过程,过度活化PKA抑制诱导剂诱导的血小板的聚集功能。
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