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背景和目的前列腺癌在西方发达国家男性中较为高发,且死亡率较高；但近些年来,随着我国男性前列腺癌的发病率的直线上升,前列腺癌也正悄悄改变着中国中老年男性的预期寿命和生活质量,并已成为肿瘤研究领域内一项越来越重要的课题,因此人们关于前列腺癌的发生发展机制、诊断技术、治疗途径及预后的监测均进行了大量的研究,其中前列腺癌的发病机制逐渐引起了人们的重视,以求做到早诊断,早治疗,提高其治愈率。DNA异常甲基化作为表观遗传学中最常见的现象之一,其在恶性肿瘤发病机制中占据着举足轻重的地位,DNA高甲基化可抑制基因表达,导致基因沉默,此发生率比基因突变更高；而低甲基化可导致基因印记丢失,同样可致癌变。对于前列腺癌,DNA甲基化也成为其研究的新热点,它揭示了前列腺癌的发生发展的分子机制,提高了前列腺癌的早期诊断率,评估预后并为其治疗提供新靶点。目前发现前列腺癌中至少有50种基因存在高甲基化现象,包括谷胱甘肽S-转移酶(GSTPl)基因、钙粘素(CDH)基因、维甲酸受体p(RARβ)基因、死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因、Ras相关区域家族1A (RASSFlA)基因、雄激素受体(AR)基因等；其中RASSFIA基因作为一种新型候选抑癌基因,具有调控细胞周期、调节细胞凋亡及微管稳定性等生理功能,在多种肿瘤中均表现为高甲基化状态；而GSTPl可代谢多种外来毒物及致癌化合物,从而避免损伤DNA,保护正常细胞,防止肿瘤细胞形成。同时,DNA甲基化是一可逆过程,可给予甲基化抑制剂进行逆转。本研究选取三氧化二砷(As203)作为DNA甲基化抑制剂,探讨它对RASSF1A及GSTP1基因甲基化状态的逆转及可能的机制,为前列腺癌的诊断和治疗提供实验依据。材料和方法1.细胞培养选用雄激素非依赖性前列腺癌DU145细胞,用PRMI-1640培养液(含10%胎牛血清)在细胞培养箱中(T:37℃,5%CO2)常规培养；2.建立前列腺癌裸鼠移植瘤模型并处理、分组取DU145细胞(处于对数生长期),制成单细胞悬液,以1×107/ml的浓度接种裸鼠,注射部位为右侧前肢近腋窝处背部皮下。将筛选过后的裸鼠随机分为4组,’分别给予生理盐水、比卡鲁胺、三氧化二砷、三氧化二砷+比卡鲁胺,成瘤后处死取标本；3.应用RT-PCR检测四组组织标本中RASSF1A、GSTP1mRNA的表达,观察其差异性；4.应用甲基化特异性PCR检测四组标本中RASSF1A、GSTP1DNA的表达,观察其DNA甲基化情况；5.应用免疫组织化学法检测四组标本中RASSF1A、GSTP1蛋白的表达情况；6.统计学处理：采用SPSS17.0软件进行分析,定量资料采用t检验,以a=0.05为检验水准。结果1. RT-PCR结果显示：As203组和As203+比卡鲁胺组处理后的前列腺癌移植瘤组织RASSF1A及GSTP1mRNA均恢复表达,且无明显差异(P>0.05)；2.MSP结果显示：As203组和As203+比卡鲁胺组处理后的前列腺癌移植瘤组织RASSF1A及GSTP1DNA均出现去甲基化改变,且无明显差异(P>0.05)；3.免疫组化结果显示：As203组和As203+比卡鲁胺组处理后的前列腺癌移植瘤组织RASSF1A及GSTP1蛋白表达均为阳性。结论1.一定剂量的三氧化二砷对前列腺癌裸鼠移植瘤RASSFIA及GSTPlDNA具有去甲基化作用；2.一定剂量的三氧化二砷能诱导RASSFIA及GSTPl mRNA和蛋白质的重新表达。