EPA和DHA是人体必须的ω-3不饱和脂肪酸，在治疗和防治心脑血管疾病、炎症、抑制肿瘤以及预防老年痴呆等方面具有较好的疗效。但是EPA与DHA的功效不同，有必要将二者分离成纯品，以充分发挥各自的功效。从文献中已经提出的分离方法中，超临界流体色谱（SFC）是比较有前景的。虽然有少数几篇有关的文献，但是内容属于工艺的初步探索。有必要在超临界色谱的理论基础方面（吸附等温线、扩散、传质和色谱动态特性等）作系统的研究，使色谱分离的研发建筑在坚实的工程原理基础上。从学术研究角度来看，至今还没有系统研究上述理论问题的报道，所以这一工作也有学术意义。本论文的具体工作如下。扩散系数测定采用Taylor提出的峰扩展法（CPB）测定了AA-EE、EPA-EE和DHA-EE在308.15 K至338.15 K和8.42 MPa至29.95 MPa条件范围内，在无限稀释条件下的扩散系数。这三种脂肪酸乙酯在超临界CO₂中的扩散系数范围分别为（5.54至13.47）×10^-5cm²·s^-1，（5.54至13.80）×10^-5cm²·s^-1和（5.40至12.80）×10^-5cm²·s^-1。它随CO₂密度的升高和温度的降低而降低，主要受CO₂密度和粘度的影响：在相同的密度条件下，D₁₂／T基本相同。相同的条件下，脂肪酸的扩散系数比其甲酯或乙酯的扩散系数要小。采用预测模型Scheibel、Catchpole-King和He-Yu-Su模型得到的预测结果与实验值相比，平均相对偏差均小于2％。吸附平衡的研究建立了一套可以在线检测的、消耗样品量比较少的静态测定吸附平衡数据装置。并在318.15 K至338.15 K温度范围内和9.98 MPa至21.97MPa压力范围内，研究了超临界CO₂中EPA-EE和DHA-EE在C18键合硅胶上的吸附平衡关系。实验结果表明，超临界CO₂中EPA-EE和DHA-EE在C18键合硅胶上的吸附量随温度的上升和CO₂密度的增大而减少，并且其吸附等温线可用BET方程来描述。实验条件范围内，两种脂肪酸乙酯在C18键合硅胶上的单分子层饱和吸附量范围分别为（0.039至0.048）mmol·g^-1和（0.040至0.063）mmol·g^-1。两种脂肪酸乙酯在C18键合硅胶上的吸附热随着吸附量的增大和密度的增大而减小，直至达到一个最低值(约为10 kJ·mol^-1)。此外，还采用特征点洗脱法（ECP），在319.15 K至340.45 K温度范围内和0.668 g·ml^-1至0.734 g·ml^-1密度范围内研究了超临界CO₂中，两种脂肪酸乙酯在硅胶上的吸附平衡关系。实验结果表明，EPA-EE和DHA-EE在硅胶上的吸附等温线可用Langmuir方程来描述。平衡常数随着密度的增大和温度的上升而减小。在实验条件范围内，两种脂肪酸乙酯在硅胶上的单分子层饱和吸附量范围分别为（0.125至0.144）mmol·g^-1和（0.113至0.131）mmol·g^-1。两种脂肪酸乙酯在单位面积C18键合硅胶和硅胶上的单分子层饱和吸附量相差不大在(2.8x10^-7至3.9×10^-7)mol·m^-2范围内。色谱过程动态特性的模型采用速率模型方程描述EPA-EE和DHA-EE在超临界流体中色谱分离过程。利用流出曲线拟合的方法研究了CO₂流速、温度和压力对EPA-EE和DHA-EE在色谱柱内传质的影响。实验结果表明，N随流速的增大有极大值，k_f先随流速的增大而增大，然后趋于一定值。压力的增大和温度的下降会导致理论塔板数减少，并使总传质系数变小。轴向弥散系数在超临界流体色谱中对理论塔板高度的贡献在3.2％至16.9％之间，并且随着温度的降低和压力的增大而减小。超临界流体色谱法从鱼油中分离提纯EPA-EE和DHA-EE建立了一套适合半制各型超临界流体色谱的馏分收集方法（固相收集法），在固相收集柱内压力为4 MPa至6 MPa时，收集过程的回收率超过95％。采用此方法，研究了不同上载量和CO₂流速下超临界CO₂中EPA-EE和DHA-EE在C18柱（250mm×10mm I．D．）上进行分离时的动态曲线。结果表明，EPA-EE和DHA-EE相互之间的分离很好，原料中硬脂酸乙酯、油酸乙酯和AA-EE与EPA-EE不能分离，AA-EE，二十二碳四烯酸乙酯和二十二碳五烯酸乙酯与DHA-EE不能分离。根据动态曲线，研究了上载量和CO₂流速对生产能力、回收率和流动相消耗的影响。结果表明，产品含量要求为90％时，色谱柱的生产能力随着流速的增大而增大；随载量的增大而增大，但载量过大则生产能力又会减小。回收率随载量的增大而明显减小，CO₂消耗量随载量的变化有最低点，在载量为4.076 mL·L^-1时为最小。适宜载量为7.13 mL·L^-1，流动相流速为3.928 g·min^-1。降低鱼油原料中难分离杂质的含量，并对半制备结果在制备柱（250mm×50mm I．D．）上进行放大。结果表明，采用不同的鱼油原料制备的结果是不同的。反相高效液相色谱分离EPA-EE和DHA-EE研究了甲醇／水配比，流速，柱温对分离的影响。选取甲酵／水（v／v）=88：12作为适宜流动相配比，在制备柱上进行放大。