甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)的分子变异及其RNA4全长cDNA克隆的构建

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以甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)内蒙呼和浩特分离物RNA为模板,通过反转录和PCR扩增得到RNA2"三联基因区"至3端的核苷酸序列,经EcoRI酶切得到1.5kb和0.9kb大小两个片段.将0.9kb片段经补平后克隆到pGEM-7Zf(+)上,然后进行序列测定,对1.5kbPCR产物则直接进行序列分析.将BNYVV全长RNA4的RT-PCR产物克隆到含有花椰菜花叶病毒35S启动子的载体pCap35J2上.得到重组质粒p35SBN4,但因为缺乏RNA4自然缺失突变体,所以进一步的质粒表达及侵染性的检测工作没有继续.
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