【摘 要】
：
目的:本研究旨在探索鼠白蛋白基因启动子/增强子(mAlb)调控下人钠/碘同向转运体(hNIS)基因的组织特异性表达介导肝癌核素显像和治疗的可行性,为NIS基因作为新型报告基因和治
论文部分内容阅读
目的:本研究旨在探索鼠白蛋白基因启动子/增强子(mAlb)调控下人钠/碘同向转运体(hNIS)基因的组织特异性表达介导肝癌核素显像和治疗的可行性,为NIS基因作为新型报告基因和治疗基因在基因治疗领域的应用提供实验依据。方法: 1、质粒构建。采用经典分子克隆技术构建mAlb调控下萤虫素酶表达载体pmAlb-Luc和mAlb引导下hNIS/潮酶素(hyg)基因共表达的重组逆转录病毒载体pSIRmAlbhNISIVSIREShyg。2、瞬时转染与荧光检测。脂质体法将pmAlb-Luc转染鼠肝癌细胞(MH3924A)、人未分化型甲状腺癌细胞(SW1736)、人乳腺癌细胞(MCF-7)和人大细胞肺癌细胞(LCLC-103H)后24小时检测萤虫素酶活性以评价mAlb的功能和组织特异性。3、稳定转染。脂质体法将pSIRmAlbhNISIVSIREShyg转染包装细胞EcoPake293,获取重组逆转录病毒颗粒感染鼠肝癌细胞(MH3924A),潮霉素筛选3周后建立NIS稳定表达细胞系。4、体外核素摄取和流出实验。体外培养条件下,评价重组肝癌细胞对125I或99mTc的摄取和流出情况及各种抑制剂对摄取和流出过程的影响。5、克隆形成实验。不同放射性浓度的131I作用下,计数克隆形成数目,评估131I对野生型和重组肝癌细胞的杀伤作用。6、移植瘤模型建立。ACI大鼠侧腹部接种野生型和/或重组肝癌细胞,待肿瘤长至直径0.6-1.0时用于核素生物分布和治疗研究,肿瘤长至直径1.0cm时用于核素显像研究。7、生物分布。研究不同给药模式下131I在荷瘤鼠体内的生物分布。8、核素显像。体内成瘤条件下,评价重组肿瘤细胞和野生型肿瘤细胞对131I、99mTc的摄取和流出情况。9、体内131I治疗实验。成瘤条件下定期观测肿瘤大小评价治疗剂量131I对肝癌细胞的杀伤作用。结果: 1、酶切及序列测定证实萤虫素酶表达载体pmAlb-Luc和mAlb引导下hNIS/潮酶素共表达的重组逆转录病毒载体pSIRmAlbhNISIVSIREShyg构建成功。2、
其他文献
早熟大粒葡萄新品种─京玉与京亚杨美蓉，张映祝（中国科学院植物研究所北京植物园１０００９３）在世界果品生产中，无论是产量或栽培面积，葡萄一直居于首位。全世界共有葡萄品种近万个，而广泛栽培
糖尿病(dlabels menitus，DM)是由遗传和环境因素共同作用而引起的一组以糖代谢紊乱为主要表现的临床综合征，胰岛素分泌、胰岛素作用或两者同时存在缺陷引起碳水化合物、脂肪、蛋白质、水和电解质等代谢紊乱；其相当于中医的消渴范畴，分为上、中、下消。糖尿病的护理一直受到人们的重视，现将其简述如下。
第一部分DPC4/Smad4 在胰腺癌组织中的表达及意义检测胰腺癌组织和正常胰腺组织中DPC4/Smad4 的表达情况,探讨DPC4 基因在胰腺癌发病机制中的作用。本实验运用RT-PCR 和免疫
在互联网时代，网络的开放性和匿名性促进了信息发布的繁荣与泛滥，每一个人既可能是信息滥用的始作俑者，又可能是信息滥用的受害者。网络群体性事件是个人信息滥用的重灾区，在程度
请下载后查看，本文暂不支持在线获取查看简介。
Please download to view, this article does not support online access to view profile.
简述了纤维增强聚合物（FRP）材料在桥梁工程中应用现状的基础上，提出了树脂辅助螺栓连接结构，设计了静态和疲劳性能试验的工装结构，以RenGel-SW404树脂和Sikadur-30树脂为代表材料，
目的:p14ARF基因是一细胞周期调控基因,它主要阻滞细胞于G1期和G2/M期,大量临床及实验研究发现p14ARF的变异,如其基因缺失、启动子甲基化等与恶性肿瘤的发生、发展和预后密切
一支手枪 我加入抵抗运动几个月后,得到一支口径为6.35毫米的左轮手枪和几颗子弹、后来在一间秘密小屋里,我学会了使用和保养,有时上级还发一些有关武器、弹药使用的简易教
农业作为第一产业,是我国经济发展与国计民生的基础,而农业生态效率是衡量一个国家或地区农业发展情况的关键指标。首先对农业生态效率的提出及评价进行回顾总结,并运用固定
在2010年采自山东省五莲县烟草Nicotiana tabacumLinn．根围土样中，分离到遍居线虫属群体，通过系统的形态学观测，鉴定为单宫遍居线虫Ecumenicus monohystera（de Man，1880）Thorne，1974