腺相关病毒载体(AAV)是一种安全性高,免疫原性低,感染性广的基因治疗载体。因为眼睛组织的结构特点,使AAV成为视网膜基因治疗中最受欢迎的基因载体。Muller细胞是哺乳动物视网膜中主要的神经胶质细胞之一。Muller细胞在维持体内平衡,组织结构完整和信号转导中起到重要作用。在多种类型的视网膜病变中,都发现Muller细胞的胶质增生性反应的参与。由于Muller细胞的这种特性,找到一种对Muller细胞有高趋向性的AAV基因治疗载体将具有重要意义。在我们的研究中,利用氨基酸定点突变,构建了一种wt rAAV6病毒的衣壳突变体rAAV6-S663L。对体外培养的细胞进行感染,包装的病毒可有效感染细胞,表达荧光蛋白。另外,有Muller细胞特异性启动子的rAAV6-S663L,可以在体外培养的Muller细胞中表达。体内成像,视网膜铺片,视网膜冰冻切片结果显示rAAV6-S663L在小鼠视网膜中与wt rAAV6有不同的趋向性。wt rAAV6趋向于神经节细胞,而rAAV6-S663L更优先靶向Muller细胞。由Muller细胞特异性启动子的基因表达实验和IHC实验结果证实rAAV6-S663L对Muller细胞的趋向高于wt rAAV6。另外,我们使用两种rAAV6-S663L病毒,其中一种由GFAP启动表达EGFP,而另一种由CMV启动表达mCherry。用这两种rAAV共同感染小鼠视网膜,进一步证明,rAAV6-S663L对Muller细胞有更高的趋向性。本研究从各方面来论证了 rAAV6-S663L对Muller细胞的高度趋向性。rAAV6-S663L可作一种新的治疗载体,为深入研究Muller细胞和治疗其相关疾病提供了新的途径。