谷氨酰胺对阻塞性黄疸大鼠免疫功能、肠道细菌移位、肝组织细胞凋亡及相关基因bcl-2、bax的表达影响 专业：普通外科学 导师：谭毓铨阻塞性黄疸是一种常见的临床表现，是由于血清内胆红素浓度增高，使巩膜，皮肤，结膜，体液和其他组织被染成黄色。阻塞性黄疸的病因以胆管结石、胆管炎症及胆管狭窄为主、恶性肿瘤为次。阻塞性黄疸患者肠道屏障的破坏，所导致的细菌过度生长，细菌移位，内毒素血症和免疫功能低下是阻塞性黄疸患者死亡的重要原因。谷氨酰胺(Ｇlutamine、Ｇln)是L-谷氨酸的γ-羧基酰胺化合物，它在生命活动中起着重要的作用。作为人体内含量最丰富的自由氨基酸之一,它在维持人体正常生理代谢方面起着重要作用。1.　Ｇｌｎ的生理代谢Ｇln是体内最丰富的氨基酸,占全身游离氨基酸的50%,血中浓度为600～650μｍｏｌ/Ｌ,肌细胞内浓度为20ｍｍｏｌ/Ｌ,比血浓度大30倍。Ｇln在体内能合成,但在应激状态,单靠体内合成远不能满足机体需要。如不能进食,则必需通过静脉补充。肠粘膜细胞数量大,生理负荷重,代谢活跃,能量需求大,其Ｇln酶活性高,Ｇln是肠粘膜上皮、淋巴组织等代谢旺盛细胞和组织的主要能源。 2．Ｇｌｎ对肠粘膜的保护作用:一、肠道是人体最大的细菌和毒素库,菌种达400至500种,菌重约1000ｇ,这一庞大的菌群和毒素之所以能局限于肠内而不向肠外扩散,是因为正常条件下肠道存在一较完整的屏障功能。肠屏障功能包括机械、免疫、生物和化学屏障,以前三者最为重要。机械屏障由肠道粘膜上皮细胞、细胞间紧密连接与菌膜三者构成,能有效阻止细菌穿透粘膜进入深部组织。肠道常驻菌群是一个相互依赖又相互作用的微生态系统,这种微生态平衡构成了肠生物屏障，Gln作为小肠代谢底物是小肠保持正常结构的重要条件之一。在TPN营养液中加入Gln,可改善大白鼠TPN所致肠道粘膜萎缩以及粘膜中蛋白质和核酸的含量。同样Gln也是淋巴细胞和巨噬细胞的主要能量物质之一,提供Gln,可促进SlgA的分泌,降低<WP=74>肠细菌移位率,从而保护肠屏障功能。 3.　GLn降低应激时高代谢反应、维持氮平衡的作用:在创伤、手术、感染等应激情况下,体内Ｇｌｎ减少,在这种情况下,Ｇｌｎ在细胞内的浓度降50%,血浆的浓度也可下降30%。利用含Ｇｌｎ的ＴＰＮ可降低高分解代谢,维持氮平衡,促进蛋白质合成。4.Ｇｌｎ有增强肌体免疫功能和抗感染作用:谷氨酰胺与巨噬细胞的免疫功能①Gln是巨噬细胞的重要能源底物　巨噬细胞是高代谢活性细胞,能源底物的提供是维持其高代谢活性的基本条件。Gln是提供和维持巨噬细胞内三羧酸循环的重要代谢底物,是巨噬细胞的主要能量来源。②Gln与巨噬细胞吞噬功能　吞噬和吞饮作用是巨噬细胞的重要功能,通过吞噬和吞饮作用清除微生物、外源性颗粒以及肿瘤细胞。③Gln与巨噬细胞的分泌功能　单核巨噬细胞RNA的合成是调节蛋白质生成的重要步骤,包括膜蛋白、分泌性蛋白(TNF-α、IL-1和IL-6等)以及合成溶酶体酶,也是免疫应答的基本功能。Gln在巨噬细胞内的代谢大约5%～25%是被完全氧化,而大部Gln经酶解途径产生谷氨酸、天冬氨酸、氨和CO2。因此,巨噬细胞对Gln的高利用率,除了提供细胞活动的燃料外,还能为细胞合成RNA和DNA所需的嘌呤提供氮源。 细胞因子(TNF-α和IL-1等)是免疫反应的主要调节因子,主要来源于被激活的巨噬细胞,不同的巨噬细胞亚群分泌细胞因子的种类和能力存在明显差异。Wallace和Keas研究了体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞,在不同浓度的Gln培养液中,观察巨噬细胞分泌IL-1的能力,结果当Gln浓度从2mmol/L降至0.03mmol/L时,IL-1的分泌量减少了35%;缺乏Gln的培养液中,IL-1的分泌下降60%,表明巨噬细胞合成和分泌IL-1的能力是依赖Gln的。同样Moskovitz等也观察到在巨噬细胞的最后分化阶段,Gln对于合成TNF-α和IL-1是必需的。免疫系统中淋巴细胞的增殖有赖于Ｇｌｎ提供能量和合成核酸的氮源，Ｔ淋巴细胞增殖必须增高。 含Ｇｌｎ的ＴＰＮ可维持大鼠肠道正常的淋巴组织及ＩｇＡ水平, 综上所述,Gln的高利用率对维持和精确调节巨噬细胞的免疫功能是十分必要的,应激状态下出现的免疫抑制与低血浆浓度的Gln有关。因此,维持血浆Gln的浓度有利于改善单核<WP=75>巨噬细胞的功能,是调节机体免疫紊乱的重要环节。提示能够通过特殊的营养支持以增加肌肉和血浆Gln的浓度,改善机体应激时的免疫功能抑制状态5.Ｇｌｎ在肿瘤治疗中的作用:肿瘤细胞内谷氨酰胺酶含量较高,可利用Ｇｌｎ来供能,并与宿主竞争循环中的Ｇｌｎ,其摄取和消耗的Ｇｌｎ高于正常体内器官,如肝细胞瘤消耗Ｇｌｎ是正常细胞的5～10倍。随肿瘤的生长,带瘤宿主血浆和组织的中Ｇｌｎ下降,肌肉释放也增加,最终至体内Ｇｌｎ的ＴＰＮ的带瘤大鼠的肿瘤重量、肿瘤中ＤＮＡ含量和谷氨酰胺酶含量无增加,提示Ｇｌｎ不刺激肿瘤生长。Ｇｌｎ对肿瘤病人可能有改善氮平衡、减少蛋白分解、提高机体免疫力的作用。由于肿瘤和肝脏是Ｇｌｎ的主要消耗者,肌肉加速释放Ｇｌｎ来维持循环Ｇｌｎ池,Ｇｌｎ耗竭逐渐严重。在疾病后期,由于代谢需要肝脏消耗循环池中的Ｇｌｎ,动物死于Ｇｌｎ耗竭。6.　Ｇｌｎ的一些其他作用:Ｇｌｎ的其?