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目的:观察人尿激肽原酶对低氧高二氧化碳模型大鼠肺动脉高压的影响及可能机制的探讨；观察人尿激肽原酶对正常大鼠心、肺血流动力学的影响。
方法:将40只雄性SD大鼠随机分成4组,A组即正常+NS干预组(NC组,n=10),B组即正常+HUK干预组(NCU组,n=10),C组即低O2高CO2+HUK干预组(HC组,n=10),D组即低O2高CO2+NS干预组(HH组,n=10)。将C、D两组大鼠置于常压低O2高CO2舱内,通过氮气(N2)调节舱内O2浓度维持在9％-11％,输入CO2使其舱内浓度为5％-6％,每天8h,共4周,每周6d；各组均于造模第四周始给药,A、D两组大鼠经尾静脉注射生理盐水1ml,共给药6天；B、C两组大鼠给予人尿激肽原酶,按1.6×102PNA/Kg的剂量溶于1ml生理盐水中,经尾静脉注射,共给药6天。饲养到相应时间点后,大鼠用戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉后,以右心导管法测定平均肺动脉压(mPAP),经左侧颈总动脉测量平均颈动脉压(mCAP)；处死动物后取心肌,分离并称量心肌重量,测定右心室肥厚指数(RV/(LV+S))和RV/BW；肺组织切片采用苏木精-伊红(HE)染色,Weigert弹力染色法染色观察肺组织病理学变化、肺血管重建和弹力纤维的变化,经图像分析技术测定大鼠肺小动脉脉管壁厚度指标(管壁厚度占外径的百分比(WT％)和管壁面积占总面积的百分比(WA％))；RT-PCR法测组织激肽eNOSmRNA的表达,进行半定量分析,用免疫组化染色法检测各组大鼠肺小血管壁的激肽B2受体蛋白和eNOS的表达及吸光度值的变化。
结果:
1.大鼠的mPAP在D组(22.2340±2.34mmHg)较A组(13.2020±1.17mmHg)大鼠明显增高(P<0.05)；C组(16.0909±1.05mmHg)较D组大鼠的mPAP明显降低(p<0.05),而A组和B组(11.8910±1.63mmHg)比较无明显差异(p>0.05);
2.四组大鼠之间的mCAP:A组(117.1158±5.78 mmHg)、B组(122.9740±6.49mmHg)、C组(114.0028±6.12mmHg)和D组(122.7880±12.57 mmHg),各组间压力比较均无明显差异(p均>0.05)。
3.大鼠RV/WB在D组(0.7449±0.14)较A组(0.5371±0.07)大鼠的比值明显增高(p<0.05)；C组(0.6208±0.09)较D组大鼠心肌RV/WB比值明显降低(p<0.05),而A组和B组(0.4795±0.04)大鼠比较无明显差异(p>0.05)。大鼠RV/(LV+S)在D组(0.3577±0.06)较A组大鼠(0.2400±0.03)的比值明显增高(p<0.05)；C组大鼠(0.2697±0.07)较D组大鼠RV/(LV+S)明显降低(p<0.05),而A组和B组(0.2589±0.02)大鼠比较无明显差异(p>0.05)。
4.大鼠WA％,WT％,PAMT在D组(51.07±4.91％,35.46±8.11％,43.3139±3.53)较A组大鼠(30.71±3.16,21.01±3.21,27.2642±2.00)的值明显增高(p均<0.05)；C组(38.59±3.29％,27.57±4.3296,31.4576±4.59)较D组大鼠肺组织WA％,WT％,PAMT的值明显降低(p<0.05),而A组和B组(28.75±1.16％,22.48±1.62％,24.19±1.30％)间肺组织WA％,WT％,PAMT比较无明显差异(p>0.05)。
5.大鼠肺组织eNOS蛋白在D组(0.3050±0.0216)较A组大鼠(0.4836±0.0487)肺组织的表达水平明显降低(p<0.05)；C组(0.3737±0.0208)较D组大鼠肺组织的eNOS表达水平明显增高(p<0.05),而A与B组(0.5323±0.0374)间肺组织的eNOS表达水平无明显差异(p>0.05)。
6.大鼠肺组织eNOSmRNA在D组(0.2275±0.0613)较A组(1.1125±0.2219)大鼠表达水平明显降低(p<0.05)；C组(0.5261±0.0877)较D组大鼠肺组织的eNOSmRNA表达明显增高(p<0.05),而A和B组(0.8674±0.1008)间eNOSmRNA的表达无明显差异(p>0.05)。
结论:
1.人尿激肽原酶可有效降低低O2高CO2模型大鼠的肺动脉平均压(mPAP)及减轻其右心室肥厚；2.人尿激肽原酶可上调低氧高二氧化碳模型大鼠肺组织中eNOSmRNA的表达,增强eNOS活性,这可能是HUK降低其肺动脉高压的机制之一；3.人尿激肽原酶对正常大鼠肺动脉平均压(mPAP)和颈动脉压(mCAP)无影响。