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目的1.探讨外周血单核细胞和H460细胞及肺成纤维细胞相互作用对产生IL-1β与TNF-a的影响。2.建立人肺成纤维(HFL)细胞三维立体培养膜型,探讨IL-1p对肺成纤维细胞MMP-2表达及细胞增殖的影响。3.观察不同浓度的地塞米松(DEX)对TNF-α诱导的人非小细胞肺腺癌H460细胞增殖的影响,探讨TNF-a在肺癌的侵袭和转移中的作用,从而为肿瘤的治疗提供理论基础。方法1.三维胶原立体培养条件下,分为：单核细胞、H460细胞、肺成纤维细胞培养组,单核细胞和H460细胞共同培养组,单核细胞和肺成纤维细胞共同培养组,H460细胞和肺成纤维细胞共同培养组,单核细胞、H460细胞和肺成纤维细胞共同培养组,培养24、72、96h,收集上清液,用酶联免疫法检查不同时间点各组IL-1β与TNF-α的含量。2.采用肺成纤维细胞建立三维立体培养膜型,分成对照组与实验组,对照组用不含IL-1β的DMEM培养,实验组分别加入含不同浓度的IL-1β(10,20 ng/ml)的DMEM培养液,用倒置显微镜观察细胞的形态,培养24、72h后收集培养上清液,应用明胶酶谱法测各组MMP-2的表达情况；采用MTT比色实验观察IL-1β对肺成纤维细胞细胞增殖的影响。3.体外培养H460,经TNF-α刺激后,将其随机分为对照组和实验组,对照组用不含地塞米松的DMEM培养液培养,实验组则分别加入含不同质量浓度地塞米松(25,50,100,200μg/ml)的DMEM培养液。通过MTT比色实验观察地塞米松对TNF-α诱导的H460细胞增殖的抑制作用,采用倒置相差显微镜观含TNF-a(50 ng/ml)的H460细胞在添加不同浓度地塞米松的胎牛血清培养基中,培养一定时间后的细胞形态学改变。结果1.各组细胞在三维立体胶原培养条件下生长良好,单独培养时,仅单核细胞组分泌少量的IL-1p和TNF-a,而H460细胞组、肺成纤维细胞组没有检测到IL-1p和TNF-α；单核细胞和H460细胞共同培养组分泌的IL-1β与TNF-α量增高,单核细胞和肺成纤维细胞共同培养组分泌的IL-1p与TNF-α量也有轻微的增高,而H460细胞和肺成纤维细胞共同培养组仅检测到少量IL-1p与TNF-a的表达。单核细胞、H460细胞和肺成纤维细胞共同培养组分泌的IL-1p与TNF-α量明显高于其它培养组。2.细胞生长情况观察,三维胶原立体培养中,肺成纤维细胞均悬浮生长于胶原中,细胞在胶原内几乎不分裂,呈单细胞生长；各实验组的肺成纤维细胞在不同浓度的IL-1p作用下,细胞表达的MMP-2有差异(P<0.05),且随着IL-1β浓度的升高,表达MMP-2的量增加；IL-1β可促进肺成纤维细胞的增殖(P<0.05),且具有浓度及时间依赖性,随着IL-1β的浓度升高,其对肺成纤维细胞促增殖的作用越明显。3.TNF-α(12.5～100ng/ml)可促进H460细胞增殖(P<0.05),6.25ng/ml的TNF-α对H460增殖无影响(P>0.05)；地塞米松(25-200μg/ml)对加入TNF-α(50ng/m1)培养的人H460细胞增殖均有明显的抑制作用,且具有浓度及时间依赖性,随着地塞米松的浓度升高,其对TNF-a诱导的细胞增殖的抑制作用越明显。结论1.单核细胞可以分泌少量的IL-1β与TNF-α,而H460细胞和HFL细胞不能分泌IL-1β与TNF-α,但是单核细胞和H460细胞及HFL细胞混合培养后IL-1β与TNF-α分泌明显增多。2.肺间质炎性细胞通过分泌更多的IL-1β及TNF-α上调MMPs,同时它可以通过促进间质细胞的增殖,进一步促进MMPs的表达,这为我们进一步研究炎症的作用机制及临床应用抗炎治疗提供理论依据。3.TNF-a能促进人非小细胞肺腺癌H460细胞的增殖,而地塞米松可以抑制这种促增殖作用。