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目的:NMO-IgG/anti-AQP4抗体已被多数研究证实为是视神经脊髓炎(NMO)或其疾病谱的一种特异性抗体,其抗原是星形细胞足突上的水通道蛋白4。目前NMO-IgG/anti-AQP4抗体的各种检测方法之间的特异性及敏感性在不同的人群之间尚缺乏一致性,且在国内尚未有使用荧光蛋白免疫沉淀法(FIPA)检测方法检测该抗体的报导。因此本研究的目的是:在国内建立anti-AQP4抗体检测的间接免疫荧光法(IIF),细胞分析法(CBA)和FIPA方法;比较IIF、CBA和FIPA在检测中国人群NMO疾病谱中的血清阳性率,并探讨血清NMO-IgG/anti-AQP4抗体在NMO诊断和鉴别诊断中的价值。
方法:建立三种检测NMO-IgG/anti-AQP4抗体的方法,包括IIF、CBA和FIPA。应用常规的间接免疫荧光法(IIF),以鼠脑为混合底物来检测NMO-IgG,并测量其滴度;进一步应用免疫双标法来证实。另外我们还应用细胞分析法(CBA),用来检测病人血清中anti-AQP4抗体的表达,及荧光蛋白免疫沉淀法(FIPA)来量化anti-AQP4抗体。应用盲法检测病人血清108例,其中视神经脊髓炎(NMO)组26例,视神经脊髓炎高危综合征(hrNMO)组23例,多发性硬化(MS)组29例,健康对照(HC)组30例;对其检测的阳性率进行分析。
结果:通过三种方法检测,我们发现NMO组NMO-IgG/anti-AQP4抗体阳性率分别为IIF(65.4%,17/26),CBA(92.3%,24/26)及FIPA(76.9%,20/26),hrNMO组为IIF(47.8%,11/23),CBA(60.9%,14/23)及FIPA(60.9%,14/23),MS组IIF、CBA及FIPA均为(3.4%,1/29)。正常对照组未见该抗体阳性表达。NMO组及hrNMO组血清NMO-IgG/anti-AQP4抗体阳性率明显高于对照组(p<0.01卡方检验及Fisher精确检验),其特异性相对于MS为96.6%,相对于健康对照为100%。
结论:检测血清中NMO-IgG/anti-AQP4抗体对NMO、hrNMO及MS诊断及鉴别诊断有重要意义。IIF检测、CBA检测及FIPA检测显示了良好的一致性,三种方法均可以作为检NMO-IgG常规方法,CBA法在检测方面更为敏感,FIPA检测可以量化该抗体,且不受观察者技术水平、主观判断的影响,适用于临床高通量大样品筛查,但敏感性略差。