蛋白质是生命活动的主要承担者、执行者。在细胞的整个生命周期中，所有蛋白质都处在一个不断运动、修饰、合成、降解的过程中。细胞生命活动是一个在时间和空间上高度有序的过程，为了行使不同的功能，蛋白质在细胞周期的某个特定时间会出现在一个特定空间中。定位在细胞中的特定位置是蛋白质正确行使功能的必要条件，所以蛋白质在细胞中的定位在其行使功能的过程中是非常重要的。 　　本文的研究工作选用形成GFP融合蛋白的方法进行蛋白质的细胞定位。以杆状病毒Bac-to-Bac表达系统为基础，以本实验室已有的pFastCMV载体为骨架构建了基于N端融合GFP蛋白和C端融合GFP蛋白的蛋白质细胞定位载体pFastCMV-NGFP和pFastCMV-CGFP，在所构建的载体中引入了两个不同的Bsu36I酶切位点。经过T4DNA聚合酶修饰过的PCR产物能够高通量地定向克隆到蛋白质细胞定位载体上。以人的胎肝组织为材料，利用RT-PCR技术从胎肝中扩增了56条cDNA，将其连入pMD18-T载体，经测序分析其正确性，然后将上述56条cDNA连入载体pFastCMV-NGFP，将所获得的重组质粒转染HepG2细胞，最后通过在激光共聚焦显微镜下观察GFP融合蛋白所发出的绿色荧光来确定融合蛋白在细胞结构中的表达和定位情况。 　　实验结果显示，大部分的蛋白质定位结果与蛋白质的已知分布相符合，但是由于GFP蛋白的存在，可能影响到蛋白质的真实定位，同时融合蛋白的过量表达也可能改变蛋白质的细胞定位。