黄皮种子提取物中化感物质活性的研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a0602141021
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植物化感作用是植物通过向周围环境释放次生代谢物质,直接或间接对其它生物或自身产生有害或有益作用的现象。植物化感作用能够产生天然除草剂,具有环境兼容性好、毒性低、残留少、安全性高、作用方式独特、选择性较高等特点。黄皮果(Clausena lansium(Lour.)Skeels)是一种热带水果,其种子和枝叶中含有多种能够除草、杀虫、抑菌的化感物质,具有较好的开发应用价值。因此,从黄皮果中分离出具有除草活性的化感物质具有重要意义。本文以黄皮种子为试验材料,利用硅胶柱层析技术和活性跟踪法对黄皮种子中具有除草活性的化感物质进行分离与鉴定,并从防御性酶,代谢物质等方面探究了化感物质对受体植物生理活性的影响。主要研究结果如下:1、不同浓度的黄皮种子甲醇提取物对6种受体植物(单子叶植物:稗草(Echinochloa crusgalli)、水稻(Oryza sativa)、无芒雀麦(Bromus inermis);双子叶植物:马齿苋(Portulaca oleracea)、三叶鬼针草(Bidens pilosa)、白菜(Brassica pekinensis)的种子萌发和幼苗生长均有抑制作用且抑制率与处理浓度呈正相关。提取物在10mg/mL浓度下,对上述供试单子叶植物和双子叶植物种子萌发抑制率分别为30.25%~42.38%、4.17%~22.46%,化感效应分别为-0.30~-0.42、-0.04~-0.22,对单子叶植物种子萌发抑制作用大于双子叶植物;对上述供试双子叶植物和单子叶植物茎长抑制率分别为22.92%~43.73%、63.24%~72.86%,化感效应分别为-0.23~-0.44、-0.63~-0.73,对双子叶植物茎长的抑制作用大于单子叶植物;对上述供试双子叶植物和单子叶植物根长抑制率分别为92.62%~98.46%、93.13%~97.32%,化感效应分别为-0.93~-0.98、-0.93~-0.97,对单子叶植物和双子叶植物的根长均具有显著的抑制作用,但两者间的差异性不显著。2、利用小杯法对不同萃取相进行的生物测定结果表明:各个萃取相对受体植物的化感作用大小:乙酸乙酯相>石油醚相>氯仿相≈正丁醇相>水相。从黄皮种子甲醇提取物的高极性萃取相(乙酸乙酯相)分离具有除草活性的化感物质已有报道,为了从黄皮种子中分离到具有除草活性的低极性化感物质,本试验选择低极性萃取相(石油醚相)作为进一步分离相。3、石油醚相过两次硅胶层析柱后得到馏分B2、C4。在0.3mg/mL浓度下,馏分B2处理下的马齿苋,其幼芽全部枯死,化感效应指数为-1;馏分C4处理下的马齿苋,其根长、茎长的抑制率分别为80.48%、75.36%,抑制作用显著。馏分B2、C4对受体植物的抑制作用最强,但馏分C4含量少且纯度不高,因此,将馏分B2作为主要的化感物质。4、馏分B2经纯化后得到的物质为肉豆蔻醚(myristicin)。5、在0.01~5mg/mL处理浓度下,肉豆蔻醚对无芒雀麦、水稻、马齿苋、三叶鬼针草幼苗根长的抑制活性分别是莠去津的5.1、5.1、28.4、8.3倍;对上述四种植物幼苗茎长的抑制活性分别是莠去津的14.1、1.5、121.7、9.3倍。6、不同浓度的肉豆蔻醚处理4种受体植物(单子叶植物:无芒雀麦,水稻;双子叶植物:马齿苋,三叶鬼针草)生理活性的研究结果表明,在处理浓度下,受体单子叶植物中SOD、CAT活性、可溶性糖含量先升高后降低;双子叶植物中的SOD、CAT活性、可溶性糖含量显著降低;受体植物中POD活性、叶绿素含量、可溶性蛋白含量均降低;受体植物中丙二醛含量均升高;受体植物的根系活力均呈现“先升后降”。7、化感物质肉豆蔻醚的高效液相色谱检测方法的最佳色谱条件:检测波长=210nm,流动相:甲醇/水=50/50,流速=1.0 mL/min,柱温:30℃。8、黄皮种子残渣对烟田杂草防除的试验结果表明:在高浓度处理下,黄皮种子残渣对羊蹄酸模(Rumex japonicus)、牛筋草(Eleusine indica)、铁苋菜(Acalypha australis)、狗尾草(Setaria viridis)、水蓼(Polygonum hydropiper)等烟田杂草具有一定的防除作用。当施用量为66.7kg/667m~2时,其对狗尾草的根长、茎长、鲜重、干重的抑制率分别为:37.87%、16.81%、21.42%、33.07%,抑制效果显著。
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