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脐带间充质干细胞(UC-MSCs)是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,经合适条件诱导后,可分化为多种特定的功能细胞。作为理想的种子细胞来源,UC-MSCs已被广泛应用于组织工程中治疗多种人的疾病。 本研究从人脐带的沃顿氏胶中分离出了具有成脂、成骨和成软骨多向分化潜能的脐带间充质干细胞,并探讨了其向肝细胞方向分化的潜能和对小鼠肝损伤修复的促进作用。 采用添加有HGF和FGF-4这两种生长因子的分化诱导液对UC-MSCs进行体外诱导分化21天后,免疫细胞化学检测显示:分化后的细胞表达了肝细胞的3种特异性蛋白标志物:AFP、ALB和CK-18;PAS染色法显示分化的细胞显紫红色,已具有了糖原合成能力;LDL吸收检测还表明分化的细胞具有脂蛋白吸收能力。这些结果证实:本研究分离得到的UC-MSCs具有向肝细胞方向分化的潜能。 为了进一步探讨UC-MSCs在肝病组织工程中的应用,本研究将UC-MSCs接种于新型的PHBVHHx多孔支架内,构建成细胞-支架复合物,移植到经CCL4肝损伤的小鼠模型内。结果显示:与空支架移植组及未移植的CCL4损伤组小鼠相比,在移植14天和30天后,细胞-支架复合物移植组小鼠的谷丙转氨酶(ALT)和总胆红素(TB)水平都有了明显的下降,血清白蛋白(ALB)水平则有所回升;H&E染色显示小鼠的肝组织结构逐渐恢复,坏死细胞和炎症细胞大量减少;Masson染色显示胶原纤维明显被降解。 以上结果表明:UC-MSCs对小鼠的肝损伤修复具有明显的促进作用,采用PHBVHHx支架构成的细胞-支架复合物在小鼠体内具有良好的生物相容性,可能成为未来肝组织工程的一个合适选择。