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目的:研究3D打印明胶/海藻酸钠支架的生物相容性及支架用于小鼠背部全层皮肤缺损创面后,小鼠创面的修复效果和创伤愈合过程中的组织病理学变化过程。方法:1.以明胶和海藻酸钠为原料,应用3D生物打印机制备孔隙均匀,大小形态各异的明胶/海藻酸钠生物支架。将体外分离培养的第三代大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)种植于明胶/海藻酸钠支架上,将BMSCs-支架复合物置于37℃含5%CO2的培养箱中共同培养,培养三天后细胞-支架复合物经戊二醛固定、干燥、喷金,电镜下观察细胞在支架内的生长情况。2.制备小鼠背部全层皮肤缺损的创伤模型,将动物模型随机分为实验组和对照组。将3D生物打印机制备的明胶/海藻酸钠支架覆盖于实验组小鼠创面,无菌纱布及弹性绷带包扎。对照组小鼠创面覆盖凡士林纱布后无菌纱布、弹性绷带包扎。术后观察两组创面愈合情况并拍照。在术后第1天,第3天,第7天,第14天取两组实验小鼠创口处包含正常皮肤0.5cm范围内的组织样本,固定于4%中性甲醛溶液中24h,经脱水、透明后石蜡包埋、切片,苏木精-伊红染色,光镜下观察小鼠皮肤组织切片,分析小鼠创面愈合过程的组织病理变化。结果:1.3D生物打印机根据预先设定的程序,制备了孔径均匀、大小形态各异的明胶/海藻酸钠生物支架。2.通过骨髓贴壁法分离的大鼠骨髓间充质干细胞,在传至第三代时,绝大多数细胞呈多角形,少数呈长梭形、漩涡状或簇状排列,融合度达70%以上。3.扫描电镜观察:大鼠骨髓间充质干细胞单个散在附着在支架表面,细胞多呈胖梭形,两端可见短的细胞突起,细胞表面绒毛舒展,显示细胞生长状态良好。4.创面愈合情况观察:明胶/海藻酸钠支架的覆盖作用减少了创面的出血及渗出,加快了创口愈合的速度,提高了创伤愈合的质量。5.组织病理学实验显示:明胶/海藻酸钠支架应用于小鼠背部全层皮肤缺损创面后,早中期明显减少了出血、坏死及炎性渗出,使痂皮变薄;中期促进厚度均匀的肉芽组织形成及新生毛细血管的成熟,减轻水肿;后期加快痂皮脱落,减少角化物质堆积,使再生的鳞状上皮厚度均匀,促进致密胶原形成。结论:1.大鼠骨髓间充质干细胞在明胶/海藻酸钠支架表面生长状态良好,3D打印技术制备的明胶/海藻酸钠支架具有良好的生物相容性。2.明胶/海藻酸钠支架应用于小鼠背部全层皮肤缺损创面后,可更快的促进肉芽组织形成,加快创伤的愈合,提高愈合质量。