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目的:本课题利用双向电泳(two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis,2-DE)和质谱技术(Mass Spectrometry,MS)对人血清进行蛋白质组学研究,分析蒙汉族人群的临床特征及血清蛋白质表达的差异。明确与蒙汉族人群中肥胖及2型糖尿病(Type2diabetes mellitus,T2DM)相关的蛋白。发现一些新的T2DM早期诊断标志物,为T2DM预测及诊疗提供帮助。 方法:收集本院门诊及体检中心的中青年男性180例血清,分为蒙汉族正常人各30例,蒙汉族肥胖患者各30例,蒙汉族肥胖合并T2DM患者各30例。首先对相关临床资料进行分析,然后通过2-DE纯化分离其血清蛋白质,利用硝酸银染色,最终扫描凝胶图像通过MS鉴定其差异表达的蛋白质。 结果:(1)临床资料结果:蒙古族正常组、肥胖组及T2DM组体质量指数(Body mass index,BMI)均高于相应组别的汉族BMI;蒙古族T2DM组HOMA胰岛素抵抗指数(HOMA Insulin Resistance Index,HOMA-IR)显著高于汉族T2DM组;与蒙古族正常组相比,肥胖组及T2DM组腰围(Waist circumference,WC)显著增加;HOMA-IR与WC(r=0.391)、BMI(r=0.332)、空腹血糖(Fasting plasma glucose,FPG)(r=0.958)及甘油三酯(triglycerides,TG)(r=0.298)呈正相关。(2)通过双向电泳及质谱分析成功获得蒙汉族正常人、蒙汉单纯肥胖患者及蒙汉族肥胖合并T2DM患者血清蛋白双向凝胶电泳图谱,获得异常表达蛋白质点数20个,经鉴定12个差异点均有意义,得到蛋白质7种,与汉族正常对照组(HN组)相比,其他几组的补体C4A(complement C4A,C4A)明显下调;与汉族正常对照组(HN组)相比,蒙古族正常对照组(MN组)中上调的蛋白有转甲状腺素蛋白(Transthyretin,TTR)和热休克蛋白60(Heat shock protein60,HSP60);与汉族正常对照组(HN组)相比,蒙汉族肥胖组及T2DM组上调的蛋白有血清淀粉样蛋白A(Serum amyloid proteinA,SAA)、视黄醇结合蛋白质-4(Retinol binding protein4,RBP4)、补体C3(complement C3,C3)、HSP60和TTR。与蒙古族肥胖组相比,蒙汉族肥胖合并T2DM组均表现为上调的蛋白有触珠蛋白(Haptoglobin,HP)、SAA、HSP60、RBP4、TTR和C3。与汉族T2DM组相比,蒙古族T2DM组的HP表现为上调。 结论:①蒙古族的肥胖程度及胰岛素抵抗水平比汉族更严重。②腰围(Waist circumference,WC)在一定程度上可以反映腹型肥胖及胰岛素抵抗的程度。③2-DE-MS可以鉴定差异表达的蛋白质,蒙汉族间存在一定差异,考虑与蒙古族人群高热量饮食有关,这些差异蛋白在T2DM中高表达,考虑与肥胖、胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)和T2DM相关,因此这些蛋白可以为T2DM的早期诊断提供依据。