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肌肉素是肌细胞特异分泌的多肽蛋白质，参与机体糖代谢和脂代谢。肌肉素作为一种自分泌和旁分泌因子在骨骼肌中起作用，其mRNA几乎只在骨骼肌中表达，并受营养条件和激素因子尤其是胰岛素的调控，在肥胖的患有胰岛素抵抗的小鼠骨骼肌中，肌肉素的mRNA表达水平相对于正常小鼠较高，而肌肉素蛋白能抑制由胰岛素引起的葡萄糖吸收和糖原合成，由此推测肌肉素可能与糖尿病的发生、发展有着密切联系。论文进行了原核表达并纯化肌肉素，制备肌肉素的多克隆抗体，为深入了解musclin基因的功能及其临床应用奠定基础。 本文从大鼠的骨骼肌中提取总RNA，用RT-PC方法克隆到肌肉素的cDNA，将肌肉素基因片段插入含GST标签的融合表达载体pGEX-5x-3中，构建重组质粒pGEX-5x-3-musclin进行测序，测序结果与Genebank中的进行同源性比对，DNA序列的相似度为99.25％，所编码的蛋白质的氨基酸序列相似度为100％。 将该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，并用IPTG诱导转化菌表达目的蛋白，SDS-PAGE鉴定该转化菌表达了37kDa，并用免疫印迹分析证明该蛋白为GST-Musclin重组蛋白。经表达形式分析证明，融合蛋白小部分可溶，用GSH-Sepharose Resin进行纯化后，免疫日本大耳白兔制备多克隆抗体，利用间接ELISA法和Western blot检测该重组蛋白能有效地诱导日本大耳白兔产生高水平的特异性IgG，抗血清效价可达1：32000左右，通过免疫前血清与免疫后血清对比，用Western印迹检测抗体具有很好的特异性。这些结果表明该重组蛋白免疫血清可用作检测肌肉素蛋白的特异性抗体。