铀矿尘致大鼠肺组织纤维化的相关机制研究

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目的:探讨铀矿尘对大鼠肺组织致纤维化的作用,以及铀矿尘诱导肺纤维化过程中的相关机制方法:60只成年Wistar大鼠,雌雄各半,按随机化原则分为2组,即空白对照组、铀矿尘组。采用一次性非暴露式气管内滴注染尘方法,铀矿尘组每只大鼠气管内滴注20mg/ml的铀矿粉尘悬液1ml,空白对照组气管内滴注生理盐水1ml。分别于处理后第7d、14d、21d、30d及60d每组每次随机处死6只,采集外周血、肺组织。肺组织经常规制片后,采用HE染色法观察肺组织形态学变化;天狼猩红染色法观察肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原改变;免疫组织化学-SP法观察TGF-β1、LN蛋白的表达。放射免疫法测定血浆中LN和PⅢNP的含量;硝酸还原酶法测定肺匀浆、血浆中NO含量;采用NOS催化L-Arg法测定肺匀浆、血浆NOS活性。结果:1.铀矿尘对肺组织具有明显的致纤维化作用。早期以致炎性作用为主,染尘后第30d肺组织出现胶原纤维增生明显,第60d肺组织可见大量纤维增生。2.铀矿尘致肺组织纤维化过程中可见Ⅰ、Ⅲ型胶原的大量增生,在染尘后早期主要以Ⅰ型胶原增生为主,染尘后期肺组织内Ⅰ型胶原大量沉积,同时Ⅲ型胶原明显增多,胶原沉积部位肺泡间隔大量断裂,肺泡轮廓消失。通过对Ⅰ、Ⅲ型胶原积分光密度的计算,Ⅲ型胶原增加的时间比Ⅰ型胶原含量相对较晚,其量比Ⅰ型胶原含量相对较少。铀矿尘组在染尘第21天后其Ⅰ、Ⅲ型胶原积分光密度与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3.铀矿尘致肺组织纤维化过程中染尘后期在肺组织内血管、支气管周围、血窦壁以及肺间隔的基底膜均出现LN的阳性表达,表现为增粗的线状或丛状分布。通过对LN阳性细胞积分光密度测定结果分析,肺组织中LN阳性细胞积分光密度在染矽尘后的第21d后与对照组比较显著增高,差异具有高度显著性(P<0.01)。同时血浆中LN的含量增高与肺组织中LN的表达呈现较好的一致性。4.铀矿尘致肺组织纤维化过程中TGF-β1在肺组织中的表达明显高于对照组,且在染尘后期随肺组织纤维化的增多,其肺组织TGF-β1的表达显著增强。肺组织匀浆和血浆中TGF-β1含量与肺组织TGF-β1蛋白的表达呈现良好的一致性,染尘后第21d、30d、60d肺匀浆和血浆中TGF-β1含量与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。5.铀矿尘致肺组织纤维化过程中肺匀浆、血浆NO含量以及NOS活力均发生改变,铀矿尘组肺匀浆、血浆NO含量以及肺匀浆NOS活力均高于对照组。染尘后早期增加不明显,而在染尘后第30d、60d时肺匀浆、血浆NO含量以及肺匀浆NOS活性与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1、铀矿尘能够诱导大鼠肺部组织纤维化,在纤维化早期主要是以Ⅰ型胶原纤维为主,纤维化后期Ⅰ型、Ⅲ型胶原纤维均大量增多,分布范围扩大。2、铀矿尘在致纤维化的过程中肺组织LN和TGF-β1均出现高表达,表明LN和TGF-β1在肺组织纤维化发生和发展过程中具有一定的作用。3、铀矿尘致纤维化的过程中肺组织中NO含量和NOS活性均发生增高,与肺组织纤维化程度具有一致性,但血浆中NO含量增高出现时间较晚。
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