壳聚糖基全血灌流蛋白A吸附剂的制备及评价

来源 :大连理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kary_yeah
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目前,我国有千万患者饱受自身免疫性疾病的痛苦。由于病因不清,目前对该类疾病仍缺乏有效的药物治疗方法,利用蛋白A免疫吸附柱直接吸附清除病人血液中的自身抗体和免疫复合物,被公认为目前治疗该类疾病的最有效方法。全血灌流技术省去了血浆分离步骤,降低了费用,并且避免了由于大量新血浆输入而感染各种新的病毒性疾病的可能。全血灌流技术以其简单、快速、高效去除血液中毒素分子的特点,以及显著的疗效效果和新颖的治疗方法而得到快速的发展,目前其应用正日趋广泛,所治疗的疾病已经从药物中毒、肝肾疾病扩展到一系列免疫性疾病。目前,最常用的两种蛋白A免疫吸附柱分别为瑞典金宝公司的Immunosor蛋白A吸附柱和美国Cypress Biosciences公司的Prosorba蛋白A吸附柱,二者均获得了美国食品和药物管理委员会(FDA)的认证,广泛用于抗体类疾病的治疗,但两者分别存在机械强度差、配基易脱落、流动阻力大、净化速度慢、售价太高等问题。壳聚糖具备多糖类材料良好的生物相容性以及对人体安全无毒等优良特性,表面大量的羟基和氨基为壳聚糖的化学改性提供了可能,同时,壳聚糖可以纺成纤维,血液沿丝束流动可大大降低全血灌流阻力。本文以壳聚糖纤维作为基质材料,通过环氧活化的方法,确立了一条较好的合成壳聚糖基蛋白A免疫吸附剂的路径,当环氧氯丙烷活化时间为4 h,用量为1.5mol/L, Naoh终浓度为0.4mol/L, DMSO用量为0.5 mol/L,肝素钠连接反应时间为12 h,用量为10mg/mL,并有适当长度的连接臂时,便可获得具有较好血液相容性,且较高蛋白A固载量的壳聚糖基蛋白A免疫吸附剂。此时的IgG吸附量可达到84 mg/g壳聚糖纤维。综合考虑灌流器的内压,对IgG的吸附能力以及溶血情况,选择设计出一种较优的固载蛋白A壳聚糖丝全血灌流模式并优化长径比为4:1,填充体积为80%。壳聚糖基全血灌流蛋白A免疫吸附剂对血浆中非抗体组分没有显著的吸附作用。
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