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【目的】探讨Sema7A在大鼠大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)模型中的作用及作用机制。通过颅内感染腺相关病毒载体干扰抑制Sema7A表达,观察下调Sema7A表达后对MCAO模型脑组织损伤及神经功能的影响;探究Sema7A是否通过PI3K/Akt/NF-κB信号通路调节MCAO模型脑组织损伤的炎症反应。【方法】1.选取成年雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,随机分为健康组(Normal组)、假手术组(Sham组)和MCAO模型组(MCAO组),使用Western Blot(WB)、RT-PCR技术检测Sema7A在大鼠MCAO模型中脑组织12 h、24 h、48 h的表达变化。2.构建含有Sema7A-siRNA干预序列的腺相关病毒载体,通过颅内立体定位注射的方法感染SD大鼠脑皮质区的神经元细胞,分别通过体内、体外细胞实验用WB方法检测Sema7A的表达水平验证Sema7A-siRNA下调效果。3.再次选用SD大鼠随机分组为Sham组、MCAO组、MCAO干预对照组(MCAO+control siRNA组)、Sema7A siRNA干预组(MCAO+Sema7A siRNA组),干预对照组及干预组分别用相应腺相关病毒进行脑皮质区的定位注射,3周后再进行MCAO造模,观察各组NSS评分,使用TTC染色检测脑缺血面积,HE染色观测脑组织损伤,ELISA法检测炎症因子IL-6、TNF-α的表达水平,免疫印迹法检测Sema7A的表达,免疫组化检测Sema7A的表达及定位;免疫印迹法检测各组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-NF-κB/NF-κB信号通路蛋白表达水平。【结果】1.MCAO组大鼠脑组织12 h、24 h、48 h的Sema7A mRNA表达水平随病程的发展有增高趋势,MCAO组48 h的Sema7A mRNA表达水平明显高于Sham组(p<0.05)。2.Sema7A主要表达于大鼠脑组织神经元细胞的胞浆和胞膜中。MCAO组48h的Sema7A蛋白表达水平明显高于Sham组(p<0.05)。3.感染Sema7A-siRNA AAV 3周后,MCAO+Sema7A siRNA组Sema7A蛋白表达水平与MCAO组相比明显下降(p<0.05)。4.MCAO组NSS评分、脑缺血面积及血浆IL-6、TNF-α表达水平明显高于Sham组(p<0.05);下调Sema7A后,MCAO+Sema7A siRNA组NSS评分、脑缺血面积及血浆IL-6、TNF-α表达水平明显低于MCAO组(p<0.05)。5.MCAO组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt的表达水平明显低于Sham组(p<0.05),p-NF-κB/NF-κB的表达高于Sham组(p<0.05)。下调Sema7A后,MCAO+Sema7A siRNA组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt与MCAO组相比明显增高(p<0.05),p-NF-κB/NF-κB表达水平与MCAO组相比明显下降(p<0.05)。【结论】1.Sema7A主要表达在大鼠脑组织神经元细胞的胞浆和胞膜中,且在MCAO大鼠脑缺血组织表达明显上调,可促进MCAO后炎症反应。2.Sema7A RNAi AAV可以成功敲低SD大鼠脑组织缺血区Sema7A的表达,可减少脑缺血面积、减轻炎症反应及改善神经功能缺损,其机制可能通过PI3K/Akt/NF-κB通路介导。