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前列腺癌的发病率在西方国家位于榜首、其死亡率位于男性因癌症致死的第二位。雄激素剥夺是早期前列腺癌的首选治疗手段,虽然最初反应良好,但其中大部分会发展为去势抵抗型前列腺癌,表现为雄激素非依赖性。大量临床前研究显示雷公藤红素,传统中药雷公藤(Tripterygium wilfordii)的主要成分,对雄激素非依赖性前列腺癌的疗效显著。课题组前期研究结果表明,雷公藤红素在雄激素受体(Androgen receptor,AR)阳性的前列腺癌细胞中通过靶向AR诱导保护性细胞自噬。然而,自噬对细胞凋亡的影响因药物的不同以及相同药物与不同细胞相互作用的不同而发生改变。本课题以DU145与PC-3两种雄激素非依赖的AR阴性前列腺癌细胞系为研究对象,探讨雷公藤红素诱导的细胞自噬与细胞凋亡的关系,为雷公藤红素在雄激素非依赖性前列腺癌治疗的临床前研究提供实验依据。本课题通过Western Blotting实验明确了雷公藤红素在AR阴性前列腺癌细胞中诱导细胞自噬与细胞凋亡。为探究雷公藤红素诱导的细胞自噬与细胞凋亡的关系,分别采用细胞自噬与细胞凋亡抑制剂处理后检测细胞凋亡与细胞自噬的水平变化。抑制细胞自噬后,DU145与PC-3对雷公藤红素的敏感性增强,凋亡水平上调,表明雷公藤红素在AR阴性前列腺癌细胞中诱导保护性细胞自噬。抑制细胞凋亡后,Western Blotting结果显示在DU145与PC-3中,与雷公藤红素单独用药相比,LC3-II/LC3-I、Atg7、Beclin1的表达水平均有不同程度的上调,说明细胞自噬的启动过程被激活;p62蛋白在8-24 h均显著上调,说明抑制细胞凋亡阻滞自噬潮的进行,表明细胞凋亡促进细胞自噬。接下来探究在AR阴性前列腺癌细胞中,雷公藤红素诱导细胞自噬的机制。首先,Western Blotting显示雷公藤红素诱导的自噬与Bcl-2/Beclin1相关通路无关。其次,通过q RT-PCR证实在DU145与PC-3中,雷公藤红素抑制自噬抑制分子mi R-101的表达。HIF-1可结合在mi R-101转录起始位点上游,调控其表达。Western Blotting显示雷公藤红素处理引起HIF-1α蛋白上调。在DU145与PC-3中转染HIF-1α质粒,通过q RT-PCR证实HIF-1α抑制mi R-101的表达。综上,本课题的实验结果表明在AR阴性的前列腺癌细胞中,雷公藤红素促进HIF-1α的表达,造成mi R-101表达抑制,从而诱导细胞自噬,而抑制细胞自噬有利于增强雷公藤红素在前列腺癌细胞中诱导的细胞凋亡。