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目的通过对前列腺癌(PCa)组织免疫组化染色检测,探讨RACS1/EBAG9的表达水平与前列腺癌组织的临床相关性。筛选出RCAS1/EBAG9前列腺癌高低表达细胞系,通过对相应的前列腺癌细胞转染RCAS1/EBAG9高表达质粒及RCAS1/EBAG9 shRNA质粒,对照检测RCAS1/EBAG9与上皮间质转化标记物相关变化,初步了解RCAS1/EBAG9在前列腺癌(PCa)上皮间质转化过程的作用。方法1.免疫组化染色分别检测RCAS1/EBAG9在50例前列腺癌组织(PCa)及18例良性前列腺增生(BPH)组织中的表达情况,RT-qPCR、Western blot方法对4例PCa组织标本和4例BPH组织标本检测RCAS1/EBAG9的表达,对其结果进行统计学分析。将50例PCa组织标本进行病理分级和临床分期,分析RCAS1/EBAG9的表达水平与前列腺癌的临床相关性。2.前期实验已成功获得RCAS1/EBAG9高表达质粒及实验筛选出来的RCAS1/EBAG9 shRNA质粒shRCAS1-406,结合细胞实验结果检测的RCAS1/EBAG9在4种前列腺癌细胞中内源性的表达情况,将RCAS1/EBAG9高表达质粒及对照组转染RCAS1/EBAG9相对低表达前列腺癌细胞PC3、DU145,将筛选出来的对RCAS1/EBAG9表达抑制最明显的RCAS1/EBAG9shRNA质粒shRCAS1-406、shRCAS1-NC质粒分别转染RCAS1/EBAG9相对高表达的前列腺癌细胞C42、LNCaP,采用RT-qPCR和Western blot方法检测RCAS1/EBAG9、EMT相关分子标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达变化,了解RCAS1/EBAG9在前列腺癌上皮间质转化过程中的作用。结果1.免疫组化染色结果显示RCAS1/EBAG9在PCa组织及BPH组织中的阳性表达率分别为74%(37/50)、11.1%(2/18),两者表达具有明显统计学意义(P<0.05)。RT-qPCR、Western blot结果显示RCAS1/EBAG9在前列腺癌组织中mRNA和蛋白水平表达明显高于良性前列腺增生组织(P<0.05),且RCAS1/EBAG9的表达随着前列腺癌的临床分期的增加而表达增加,随着前列腺癌病理分化程度的降低而表达增加。2.RT-qPCR和Western blot结果显示EMT相关上皮细胞分子标志物E-cadherin表达随RCAS1/EBAG9表达增高而降低,随RCAS1/EBAG9表达降低而增加。间质细胞分子标记物N-cadherin、Vimentin表达随RCAS1/EBAG9表达增高而增高,随RCAS1/EBAG9表达降低而降低。结论1.RCAS1/EBAG9在PCa组织中相比于BPH组织显著高表达,且RCAS1/EBAG9的表达与前列腺癌的临床分期、病理分级相关联。2.RCAS1/EBAG9参与前列腺癌上皮间质转化过程,可能与前列腺癌的转移相关。