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目的:研究胃癌及胃癌前病变组织端粒酶催化亚单位的表达与幽门螺杆菌感染的相关性,了解幽门螺杆菌感染对端粒酶催化亚单位表达的影响及其与细胞凋亡的关系,探讨端粒酶催化亚单位与细胞凋亡调控基因的关系,并就端粒酶与bcl-2基因间的调控关系进行研究,旨在揭示Hp、端粒酶和细胞凋亡之间的相关性,探讨端粒酶的激活机制及意义,为阐明Hp的致癌机理提供理论依据。方法:选择64例慢性胃炎及胃癌患者为研究对象,其中慢性胃炎伴萎缩者16例,伴肠化生者15例,伴中、重度异型增生者14例,胃癌19例。采用快速尿素酶试验、Warthin-Starry银染色检测幽门螺杆菌,采用Sp法检测hTERT、bcl-2、c-myc蛋白表达,采用TUNEL染色法原位检测细胞凋亡。在Hp滤液诱导前提下,采用流式细胞仪检测抑制bcl-2基因表达对SGC7901胃癌细胞hTERT蛋白表达的影响,以及抑制hTERT基因表达对SGC7901胃癌细胞bcl-2蛋白表达的影响。结果:(1)萎缩性胃炎、肠化生、异型增生和胃癌组织hTERT蛋白表达率及中等阳性、强阳性表达率分别为25.00%、46.67%、64.29%、78.95%和6.25%、13.33%、28.58%、52.63%,均呈递增趋势。胃癌组织hTERT蛋白的表达率和中等、强阳性表达率均显著高于异型增生、肠化生和萎缩性胃炎 (P<0.05),异型增生组织显著高于肠化生和萎缩性胃炎 (P<0.05),肠化生组织显著高于萎缩性胃炎 (P<0.05)。Hp阳性患者hTERT蛋白表达率为77.42%,显著高于Hp阴性患者(33.33%,P<0.01)。(2)萎缩性胃炎、肠化生、异型增生和胃癌组织细胞凋亡指数分别为11.54±2.28、17.05±2.88、7.41±1.32和5.03±2.23。胃癌组织细胞凋亡指数显著低于异型增生、肠化生和萎缩性胃炎(P<0.05),异型增生组织细胞凋亡指数显著低于肠化生和萎缩性胃炎(P<0.05),肠化生组织细胞凋亡指数显著高于萎缩性胃炎(P<0.05)。hTERT蛋白阳性患者细胞凋亡指数为8.45±5.30%,显著低于hTERT蛋白阴性患者(11.86±4.24%,P<0.05)。Hp阳性伴hTERT蛋白阳性患者细胞凋亡指数为9.57±5.01显著高于Hp阴性伴hTERT蛋白阳性患者(6.01±5.31,P<0.05)。(3)萎缩性胃炎、肠化生、异型增生和胃癌组织bcl-2蛋白表达率分别为31.25%、53.33%、57.14%和84.21%,呈递增趋势。胃癌组织bcl-2蛋白<WP=10>表达率显著高于异型增生、肠化生和萎缩性胃炎(P<0.05),异型增生组织显著高于萎缩性胃炎(P<0.05)。肠化生组织显著高于萎缩性胃炎(P<0.05)。bcl-2蛋白阳性患者hTERT蛋白表达率为71.43%,显著高于bcl-2蛋白阴性患者(34.44%,P<0.01)。萎缩性胃炎、肠化生、异型增生和胃癌组织c-myc蛋白表达率分别为25%、53.33%、64.29%和79.85%,呈递增趋势。胃癌组织c-myc蛋白表达率显著高于异型增生、肠化生和萎缩性胃炎(P<0.05),异型增生组织显著高于肠化生和萎缩性胃炎(P<0.05),肠化生组织显著高于萎缩性胃炎(P<0.05)。c-myc蛋白阳性患者hTERT蛋白表达率为77.78%,显著高于c-myc蛋白阴性患者(25.00%,P<0.01)。(4) SGC7901胃癌细胞对照组表达hTERT和 bcl-2蛋白的阳性细胞数和荧光强度显著低于经Hp培养滤液诱导的SGC7901胃癌细胞组。Hp培养滤液诱导下,抑制bcl-2基因表达后SGC7901胃癌细胞组表达hTERT蛋白的阳性细胞数和荧光强度显著低于经Hp培养滤液诱导的SGC7901胃癌细胞组(P<0.05),但显著高于SGC7901胃癌细胞对照组(P<0.05)。在Hp培养滤液诱导前提下,抑制hTERT基因表达后SGC7901胃癌细胞组表达bcl-2蛋白的阳性细胞数和荧光强度与经Hp培养滤液诱导的SGC7901胃癌细胞组无显著差异,但显著高于SGC7901胃癌细胞对照组(P<0.05)。结论:(1)胃癌前病变至胃癌的演化过程中,hTERT蛋白阳性表达率及表达强度逐渐增加,端粒酶激活可能参与了胃粘膜细胞恶性转化的全过程。Hp感染与端粒酶活性密切相关,Hp感染可能是胃粘膜上皮细胞端粒酶激活的主要机制之一,端粒酶激活可能是Hp致癌机制之一。(2)端粒酶激活抑制细胞凋亡,促进细胞永生化。Hp感染既可诱导胃粘膜细胞凋亡,又可以激活端粒酶,引发细胞永生化,破坏了胃粘膜上皮的稳定性,增加了癌变的危险性,这可能是胃粘膜细胞癌变的主要机制之一。(3) 胃癌发生过程中,端粒酶与bcl-2和c-myc基因均可能发挥了重要作用;端粒酶活性与bcl-2和c-myc表达呈正相关,bcl-2和c-myc表达增加可能参与了胃粘膜上皮细胞端粒酶激活的调控。(4)Hp滤液可以诱导SGC7901胃癌细胞hTERT、bcl-2蛋白表达增加。bcl-2基因正向调控hTERT蛋白表达,bcl-2表达上调可能是Hp激活端粒酶的主要途径之一。端粒酶的激活不完全依赖于bcl-2途径,还存在其它的调控因素。结果表明Hp感染促进bcl-2表达、激活端粒酶,可能是Hp致胃癌的一条重要途径,Hp感染不仅通过上调bcl-2的表达,还可以通过其它途径激活端粒酶。本实验结果对于进一步了解Hp致癌机理、端粒酶的激活机制以及指导胃癌的防治具有重要的意义。