有机-无机杂化介孔二氧化硅材料具有高的比表面积、良好的孔道结构、可调的粒径、良好的机械稳定性和碱性稳定性等优点,将其用作高效液相色谱填料具有重要的应用前景。本文以1,2-双（三乙氧基硅基）乙烷（BTESE）为前驱体,十二烷基三甲基溴化铵（DTAB）为表面活性剂,十八烷基三乙氧基硅烷（ODTES）为修饰剂,在碱性条件下,分别采用共缩聚和后接枝两种方法制备了C₁₈键合的有机-无机杂化介孔二氧化硅微球。研究了不同ODTES引入量对样品形貌、孔结构以及修饰效果的影响。以六甲基二硅氮烷（HMDS）为惰性化试剂,采用气固相反应法,对用作色谱填料的杂化氧化硅微球进行惰性化。采用扫描电子显微镜（SEM）、N₂吸附-脱附、X射线衍射仪（XRD）、场发射透射电镜（TEM）、元素分析、水的接触角、差热分析仪及固体²⁹Si和¹³C核磁共振等测试手段对有机-无机杂化氧化硅微球的形貌、孔结构、微观结构、疏水性能、热稳定性及化学组成进行表征。将样品填充到色谱柱中,对其进行色谱性能表征,并测试了惰性化对杂化氧化硅材料色谱性能的影响。当ODTES/BTESE的摩尔比为0.08时,通过共缩聚法制备的有机-无机杂化介孔二氧化硅微球具有理想的孔结构,其比表面积为351.82 m²g^-1,孔容为0.21cm³g^-1,平均孔径为3.72 nm,样品中的碳含量达到25.36%。该样品用作色谱填料能够完成尿嘧啶、苯酚、吡啶、1-萘胺和萘五种混合物质的基线分离,且经过高温强碱性流动相冲洗80 h之后,甲苯的塔板数仍保持在90%以上,说明共缩聚法制备的色谱填料具有良好碱性稳定性。经过HMDS惰性化后的样品,表面硅羟基的浓度由6.63 mmol·g^-1降低到4.57 mmol·g^-1。惰性化后的色谱填料能够更有效的完成五种混合物质的基线分离,吡啶与苯酚的相对保留因子α也由惰性化前的0.493增加到了2.009。当ODTES/[Si]的摩尔比为0.6时,通过后接枝法制备的有机-无机杂化介孔二氧化硅微球具有理想的孔结构,其比表面积为371.75 m²g^-1,孔容为0.35 cm³g^-1,平均孔径为4.63 nm,样品中的碳含量达到22.27%。该样品用作色谱填料能够完成尿嘧啶、苯胺、苯、乙苯、叔丁苯和正丁苯六种混合物质的基线分离,且经过高温强碱性流动相冲洗80 h之后,甲苯的塔板数仍保持在90%左右,说明后接枝法制备的色谱填料具有良好的碱性稳定性。经过HMDS惰性化后的色谱填料能够更有效的完成六种混合物质的基线分离,吡啶与苯酚的相对保留因子α由惰性化前的0.445增加到了2.866。