目的:通过观察口腔粘膜下纤维性变(oral submUCOUS fibrosis,OSF),组织中整合素仅α<,1>、α<,2>的表达与分布,及槟榔碱对体外培养的人口腔粘膜成纤维细胞(fibroblast,FB)表达整合素α<,1>、α<,2>m=RNA的影响,探讨整合素α<,1>、α<,2>OSF发病机制中的作用与机制。 方法: 1.采用免疫组织化学染色方法,观察整合素α<,1>、α<,2>在10例正常口腔粘膜组织和OSF早、中、晚期各20例病变组织中的表达与分布,并采用半定量方法检测正常口腔粘膜组和OSF各组FB上整合素α<,1>、α<,2>、的表达强度。 2.体外培养人正常口腔粘膜FB,向培养基中加入不同浓度(0、10、20、40、80、160μg/ml)的槟榔碱孵育,采用MTT法12小时后检测FB的增殖水平,采用RT-PCR法24小时后检测0、10、20、40μg/ml浓度组别整合素α<,1>、α<,2>mRNA的表达水平。 结果: 1.正常口腔粘膜组织中,整合素α<,1>、α<,2>表达低,主要分布于上皮基底细胞和血管内皮细胞,呈胞膜或胞浆阳性,FB极少见阳性表达。OSF病变组织中,除表皮基底细胞及血管内皮细胞外,FB细胞膜及胞质内均见整合素α<,1>、α<,2>的大量表达,炎症细胞上亦可见少量表达。 2.OSF各期FB表达整合素α<,1>、α<,2>均强于正常组(p<0.05)。整合素α<,1>早中期表达增高,晚期组表达降低,与中期组有统计学差异(p<0.05)。整合素α<,2>随OSF病变发展表达强度逐渐增高(p<0.05)。 3.槟榔碱浓度为10μg/ml时FB增殖活性稍有升高,但与未加槟榔碱对照组相比无显著性差异(P>0.05)。槟榔碱浓度为20μg/ml时,FB增殖活性出现下降,40μg/ml与对照组相比有显著统计学差异(P<0.05),槟榔碱对FB明显抑制。当槟榔碱浓度>40μg/ml时,对FB增殖持续显著性抑制(P<0.05)。 4.对照组整合素α<,1>mRNA表达量低,10μg/ml、20μg/ml浓度组表达逐渐升高与对照组存在显著性差异(P<0.05),40μg/ml组出现下降与10μg/ml组无显著性差异(P>0.05);对照组整合素α<,2>表达量亦低,表达量随浓度增高呈逐渐增高趋势(P<0.05)。 结论: 1.OSF病变组织中,成纤维细胞表达与分泌整合素α<,1>、α<,2>的能力 显著增强2．槟榔碱具有刺激人口腔粘膜成纤维细胞表达整合素a<,1>、a<,2>的作用。 3．槟榔碱通过刺激口腔粘膜成纤维细胞表达与分泌整合素a<,1>、a<,2>，进而诱导胶原合成增多，可能是OSF发生机制之一 。