土沉香苗木根结线虫研究

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土沉香是海南省的珍贵乡土树种之一,其含有树脂的木材——沉香是我国上等天然香料,也是我国特有而名贵的药材。海南省是我国沉香的重要产区,土沉香在海南被称为“绿色黄金”,土沉香种植已日渐成为海南当地农民经济收入的重要来源。根结线虫病是土沉香苗期的主要病害,感病的土沉香1年生小苗或2年生大袋苗出现植株矮小,叶片黄化失绿,生长缓慢等症状,严重时导致苗木生长停滞、叶片凋落,甚至枯死,且罹病苗木易患其他叶部病害,调查发现澄迈地区部分土沉香苗圃死亡率达40%~60%。本论文详细阐述了土沉香苗木根结线虫病的发病症状,同时结合形态学特征与分子生物学特性对病原根结线虫进行鉴定,进一步研究了根结线虫二龄幼虫在土沉香苗圃的发生规律与消长动态,并展开了土沉香苗木根结线虫病的防治试验。主要研究结果如下:(1)土沉香根结线虫病的危害症状与病原鉴定。受害土沉香苗木根部会形成许多大小形状不定、表面粗糙的根结,有的连接成块,随着病情的加重,根部坏死表现为疏松多孔,大部分2年生的罹病大袋苗的根颈部会形成畸形的瘤块,有的瘤块处的直径是正常处2倍多,表皮纵裂。地上部分表现为植株矮小,叶片黄化失绿,生长停滞、叶片凋落,甚至植株枯死。二龄幼虫、雌虫和会阴花纹的观察结果与杨宝君描述的象耳豆根结线虫的形态特征基本一致,利用通用引物V5367和26S对待测样品rDNA-ITS区序列进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测到扩增出来的片段长度在750 bp左右,采用过邻接法(neighbor-joining)构建系统发育树显示待测样品象耳豆根结线虫位于同一分支,支持率为100%,确定了从海南省澄迈县4个乡镇采集的样品中纯化出来的均是象耳豆根结线虫。这是首次结合形态学方法和rDNA-ITS反洗对土沉香苗木病原根结线虫进行鉴定,并首次在海南省澄迈县的土沉香上分离出象耳豆根结线虫。(2)土沉香苗木根结线虫病发生规律研究。土沉香苗圃根结线虫二龄幼虫的发生量随着土层加深,呈现数量减少的趋势。其中基质袋内土壤所含根结线虫数量占63.38%,与基质袋接触的土壤层6~10cm间根结线虫分布量占25.96%,因此从不同土层深度来看,根结线虫的发生量主要集中在基质袋内,另外还有一部分分布在与基质袋接触的浅层土壤;而从水平不同的位置来看根结线虫的发生量没有明显的差异,即在一块发病严重的苗圃地上,各位置土壤中根结线虫的发生量均比较严重。根结线虫二龄幼虫在土沉香苗圃全年均可发生,尤其以3月中旬至4月中旬,和11月中旬至12月中旬的发生量达到最高;此外苗圃土壤中根结线虫二龄幼虫的发生量受极端天气影响较大,尤其是强台风、连续暴雨、连续极端高温天气等。(3)土沉香苗木根结线虫病防治研究。研究表明3.2%高氯甲维盐微乳剂、5.2%阿维高氯乳油、40%辛硫磷乳油、0.5%苦参碱水剂、3.2%阿维菌素乳油对土沉香苗土中的根结线虫二龄幼虫数量有较好的控制效果。进一步分析表明5.2%阿维高氯乳油处理90d后土沉香苗木基本没有高生长,而且加重了地上叶部黄化、落叶症状的发病情况。因此3.2%高氯甲维盐微乳剂、40%辛硫磷乳油、0.5%苦参碱水剂、3.2%阿维菌素乳油处理可以在降低苗土中二龄幼虫发生量的同时,促进罹病土沉香苗木恢复生长,在一定程度上达到地治疗土沉香苗木根结线虫病的目的。
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