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近来的研究显示,T淋巴细胞免疫球蛋白-粘蛋白域3(Tim-3,T cell immunoglobulin domain and mucin domain-3)除了在Th1细胞上表达外,在细胞毒性T细胞、树突状细胞和NK细胞上均有表达。通过影响这些细胞功能从而参与各种疾病的发展过程。由于乙肝病毒(HBV)感染患者T细胞、NK细胞在长期自然病史中影响疾病状态,因此Tim-3在HBV感染控制与清除中可能起作重要作用。慢性乙型肝炎(慢乙肝)病程是一个动态平衡的自然病程。按HBV感染时年龄及宿主免疫系统变化,最新的美国肝病研究学会(ASSLD)慢乙肝防治指南将HBV感染的自然病程分为:免疫耐受期(IT)、免疫活动期(IA)、免疫控制期(IC)、灰色区(GZ)。每个时期的免疫状态各不同,机体的各种免疫细胞功能也不同,免疫耐受期(IT)被认为特异性免疫缺乏,免疫活动期(IA)转氨酶升高被认为是免疫觉醒的标志。而在HBV感染者不同免疫状态下比较Tim3在T细胞和NK细胞上的表达情况及其与临床病毒学、肝功能、肝纤维化指标的相关性研究则鲜有报到。因此,本论文拟对HBV感染者不同免疫状态下外周血T细胞及亚群(CD4、CD8)、NK细胞及亚群(dim、bright)上的Tim-3的表达情况进行检测和系统分析,包括慢乙肝患者T细胞、NK细胞Tim-3达与临床病毒学、肝功能、肝纤维等指标相关性,为慢乙肝的诊治新策略提供新思路。本论文的目的:分析不同时期的HBV感染者T细胞及亚群、NK细胞及亚群Tim-3表达分布情况及与临床病毒学、肝功能、肝纤维化的相关性,并探讨Tim-3分子对慢性HBV感染者的抗病毒治疗预测价值。方法:选择320例不同疾病阶段的慢性乙型肝炎患者和17例健康献血者。分为(1)免疫耐受期(Immune-tolerant phase,IT)31例;(2)免疫活动期(immune-active phase,IA)184例;(3)非活动期(Inactive CHB phase,IC)48例;(4)灰色区(Gray Zone,GZ)57例及17例正常人作为对照组(HC)。纳入320例慢性HBV感染患者,留取抗凝血分离PBMC,流式细胞术检测Tim-3在T细胞及其亚群(CD4,CD8)频数分布及平均荧光强度(MFI),Tim-3在NK细胞及其亚群(dim、bright)频数分布及平均荧光强度(MFI)。并按自然病程分期进行组间比较。对患者进行了病毒、肝功能、肝纤维检测。用SPSS 24.0和Graph Pad prism 8对数据进行统计分析。绘制Tim-3、Fibro scan单独及联合检测时的ROC曲线,比较其预测抗病毒治疗的价值。结果:(1)T细胞及其亚群的Tim-3表达在IA组显著高于其他组;而NK细胞及其亚群的Tim-3表达在IT、IC组高于其他组的。(2)T细胞及其亚群Tim-3的表达频数与ALT、AST及TBIL均呈显著正相关;其中除了CD3~+T细胞、CD4~+上的Tim-3的表达频数与TBIL无相关性,T细胞及其亚群Tim-3的MFI与ALT、AST及TBIL均呈显著正相关。NK细胞及其亚群Tim-3的表达频数与ALT、AST及TBIL均呈显著负性相关。除了亚群NK-bright Tim-3的表达频数与ALT、AST及TBIL均无相关性。NK细胞及其亚群Tim-3的MFI与ALT、AST及TBIL均呈显著负性相关。(3)T细胞及其亚群Tim-3的表达频数与Fibro scan、APRI呈显著正相关,除了CD3~+T细胞Tim-3的表达频数与APRI却无相关性。T细胞及其亚群Tim-3的MFI与Fibro scan、APRI呈显著正相关。NK细胞及其亚群Tim-3的表达频数与Fibro scan、APRI具有显著的负相关,其中除了亚群NK-bright Tim-3的表达频数与Fibro scan、APRI均无相关性。NK细胞及其亚群Tim-3的MFI与Fibro scan、APRI具有显著的负相关(4)T细胞及其亚群Tim-3的表达频数与HBV DNA无相关性,但与pg RNA显著正相关。T细胞及其亚群Tim-3的MFI与HBV DNA、pg RNA均呈显著正相关。NK细胞及其亚群Tim-3的表达频数与HBV DNA、pg RNA均呈显著负性相关。其中除了亚群NK-bright Tim-3的表达频数与HBV DNA、pg RNA均无相关性。NK细胞及其亚群Tim-3的MFI与HBV DNA及血pg RNA均呈显著负性相关(5)T细胞与NK细胞Tim-3MFI的比值预测抗病毒治疗ROC曲线预测,结果AUC值为0.793(0.732-0.852),P值为0.000,敏感度与特异性分别为65.3%、98.9%。Fibro scan预测抗病毒治疗ROC曲线AUC值为0.865(0.822-0.909),P值为0.000,敏感度与特异性分别为85.0%、77.0%。Tim-3分子与Fibro scan联合预测结果AUC值为0.913(0.873-0.953),P值为0.000,敏感度与特异性分别为91.3%、84.3%。结论:1、在慢性乙型肝炎患者免疫活动期和炎症感染期Tim-3表达随之显著升高,2、Tim-3在T细胞、NK细胞两种不同免疫细胞的作用下,与病毒学、肝功能、肝硬度有着不一样的相关性。3、Tim-3分子对慢性HBV感染者的抗病毒治疗有很好预测价值。