“补泻同施,调节平衡”法对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡影响的研究

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目的:观察“补泻同施,调节平衡”法指导组方的黄地吉仙汤对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的抑制作用,并探讨其机制。材料与方法:高糖高脂饲料+一次性小剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)+精神紧张法诱发2型糖尿病大鼠模型。将复制模型成功的大鼠分别给予不同剂量的中药复方黄地吉仙汤和二甲双胍片治疗,期间监测大鼠体重、血糖。给药8周后,测体重,血糖,处死大鼠,取胰腺标本,运用苏木素—伊红(HE)染色法观察各组胰岛形态学;运用原位末端标记(TUNEL)法、免疫组化(SP)法评价胰岛β细胞功能,进行各组胰岛细胞凋亡指数, Bcl-2、Bax阳性细胞数及(Bcl-2Bax)比值的比较。结果:1、实验结束时,中药复方黄地吉仙汤及二甲双胍片均可降低2型糖尿病模型大鼠血糖(P<0.05)。2、形态学观察:治疗后,正常组大鼠胰腺外分泌部可见胰岛分布,胰岛岛形圆润完整,岛内细胞胞体饱满,排列致密;模型组大鼠胰岛体积明显变小,轮廓不规则,岛内细胞减少、排列紊乱;中药低剂量组表现与模型组类似;中药中、高剂量治疗组与二甲双胍组大鼠胰岛岛形比较饱满圆润,岛内细胞数量较模型组增多,排列均匀紧密。3、胰岛细胞凋亡指数:模型组显著高于正常组(P <0.05);中药高、中剂量组、西药组凋亡指数明显低于模型组(P <0.05),中药低剂量组凋亡指数与模型组无显著差异(P>0.05)。4、Bcl-2、Bax蛋白表达比较:治疗后,比较各组Bcl-2阳性细胞平均数,模型组显著低于正常组(P <0.05);中药低剂量组与模型组Bcl一2阳性细胞数之间无差异(P>0.05);中药高、中剂量组、西药组Bcl一2阳性细胞数显著高于模型组(P <0.05)。模型组Bax阳性细胞数显著高于正常组;(P<0.05)中药各高、中剂量组、西药组与正常组Bax阳性细胞数显著低于模型组(P<0.05);中药低剂量组Bax阳性细胞数显著高于中药高、中剂量组。(P<0.05)5、(Bcl-2Bax)比值的比较:模型组显著低于正常组(P<0.05);中药低剂量组与模型组之间无差异(P>0.05);中药高、中剂量组、西药组(Bcl-2Bax)比值显著高于模型组(P <0.05),结论:中药复方黄地吉仙汤可降低2型糖尿病大鼠血糖,抑制胰岛β细胞凋亡,其机制为增加Bcl-2蛋白表达,减少Bax蛋白表达,提高Bcl-2/Bax蛋白比率表达。
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