杨梅苷自微乳化纳米制剂及其药效学研究

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杨梅苷(Myricitrin,MYT)在杨梅树皮以及杨梅叶中含量丰富,提取工艺简单,具有抗氧化、抗炎、镇痛和神经保护等多种药理活性。MYT的水溶性较差,这种缺点极大地限制了MYT的应用,所以提高MYT的口服生物利用度能够为MYT的广泛应用提供理论基础。目前对于MYT药理活性的研究主要集中在抗氧化、抗炎镇痛与神经保护方面,在降尿酸领域的研究很少。本文的研究目的主要是为了提高MYT的口服生物利用度并探讨MYT的降尿酸活性,为MYT的广泛应用与高尿酸血症(Hyperuricemia,HUA)的治疗提供理论依据。第一章综述本章对杨梅树皮与MYT的药理活性及其相关研究进展、自微乳药物传递系统(Self-microemulsifying drug delivery system,SMEDDS)的相关研究进展以及HUA的相关研究进展进行介绍。主要包括:杨梅树皮的主要化学成分、药理活性;MYT的理化性质、药理活性和纳米制剂研究概况;SMEDDS的组成部分、制备条件与制备工艺以及最新的研究概况;HUA的发病机制、对人体的危害以及HUA的治疗办法等内容。第二章杨梅苷的提取及其理化性质研究本章首先通过60%乙醇水溶液对杨梅树皮进行提取,对提取物进一步进行硅胶与C18柱材料分离纯化,采用薄层色谱(TLC)、高效液相色谱(HPLC)对提取的MYT进行纯度鉴定,采用核磁共振光谱(NMR)与液相色谱-质谱连用技术(LC-MS)对提取的MYT进行结构鉴定。构建MYT体外分析方法并对该分析方法进行验证,此外,还对MYT的基本理化性质进行了考察。研究结果表示提取的MYT纯度为95.41%,分子量为464.38,MYT体外分析方法验证该分析方法可靠可行,MYT在不同介质中的平衡溶解度不超过40μg/mL,油水分配系数(Log P)大于1.3,为水难溶性化合物。第三章杨梅苷自微乳化药物传递系统的制备与表征本章测定了MYT在不同辅料中的溶解度,检测了不同辅料之间的相容性,通过伪三元相图选择杨梅苷自微乳(M-SMEDDS)的最佳处方比例,并对M-SMEDDS的制备工艺进行筛选,最后通过透射电镜(TEM)、粒径、电位、包封率和体外释放等指标对M-SMEDDS进行评价。结果表明M-SMEDDS的最佳处方为:油酸乙酯18%,聚氧乙烯蓖麻油51%,异丙醇22%,MYT 9%。制备M-SMEDDS的最佳工艺条件为:搅拌温度37℃,搅拌速度300 r/min。M-SMEDDS的TEM结果表明M-SMEDDS为分散性良好、形态均一的球型。M-SMEDDS的粒径为21.68 nm,Zeta电位为-23.17 mV,包封率为92.73%。M-SMEDDS在不同pH水相介质中的体外累积释放率均超过79%,显著高于MYT原料药。第四章杨梅苷自微乳化药物传递系统大鼠体内药动学研究本章建立了MYT的体内分析方法,用以考察M-SMEDDS与MYT原料药的大鼠口服生物利用度。12只标重(200±20)g的雄性SD大鼠适应实验室环境后进行分组,6只为MYT原料药组,6只为M-SMEDDS组,实验前禁食12 h,自由饮水。MYT原料药组大鼠单次灌胃给与300 mg/kg剂量的MYT悬浮液,M-SMEDDS组大鼠单次灌胃给与含药剂量相同的M-SMEDDS,给药结束后于不同时间点从大鼠眼眶后静脉丛取血,测定血清中MYT含量,并通过BAPP 2.3药代动力学参数计算软件计算MYT的口服生物利用度等相关参数。研究结果表明MYT体内分析方法专属性良好,精密度较高,符合分析方法学相关要求。M-SMEDDS与MYT的Cmax分别为(1.81±0.26)μg/mL和(0.57±0.03)μg/mL,t1/2分别为(5.00±1.22)h和(7.37±1.19)h,MRT分别为(10.54±1.01)h和(12.834±1.11)h,Tmax均为8 h。M-SMEDDS的Cmax大于MYT原料药,相对口服生物利用度(F)为247.86%,说明M-SMEDDS的口服生物利用度得到了显著的提高。第五章杨梅苷的抗高尿酸血症活性研究本章建立了尿酸(UA)的体内分析方法,并对UA体内分析方法进行验证。大鼠灌胃给与次黄嘌呤(Hypoxanthine,HX)混悬液,腹腔注射氧嗪酸钾(Potassium oxazinate,PO)乳剂,构建大鼠急性HUA模型,并对其进行分组:空白对照组(NC),急性HUA模型组(MC),阳性对照组(PC,Allopurinol),低剂量MYT组(L-M,100 mg/kg),中剂量MYT组(M-M,200 mg/kg),高剂量MYT组(H-M,300 mg/kg),低剂量M-SMEDDS组(L-M-S,100 mg/kg),中剂量M-SMEDDS组(M-M-S,200 mg/kg),高剂量M-SMEDDS组(H-M-S,300 mg/kg)。造模1 h后除NC与MC组外,其余各组给与治疗药物,造模3 h后对各组的大鼠血清中的UA值、XOD值与肝脏组织中的XOD值进行测定。研究结果表明UA体内分析方法专属性良好,精密度与稳定性均符合相关要求。MYT能够明显降低急性HUA大鼠模型的UA水平与XOD水平,用药剂量呈剂量依赖性,且M-SMEDDS的降尿酸效果与抑制XOD活性的作用优于MYT原料药。
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