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颌骨疾病是口腔颌面外科常见病之一,其主要病理变化是各种原因引起的骨吸收或骨缺损而造成颌骨功能障碍。本实验通过建立分离、培养破骨细胞和成骨细胞的方法。为进一步研究颌骨代谢生理、病理变化,骨生长因子的促骨生成作用,以及颌骨移植材料和口腔种植材料骨生物活性的体外研究提供了实验基础。 一、破骨细胞的分离、培养:采用机械法,从引产胎儿的长骨骨腔中分离出破骨细胞,进行培养。经组织形态学、光镜和相差显微镜观察,破骨细胞具有胞体大,多核,胞浆泡沫状间有空泡,胞浆有伪足样突起,并可移动,酸性磷酸酶反应阳性。将其与人股骨皮质骨片共同培养24小时左右,骨片上出现吸收陷窝,结果表明,本实验体外分离、培养人破骨细胞的方法是可行的。 二、成骨细胞的分离、培养:采用改良的酶消化法,从新生兔的颅骨中分离出成骨细胞,进行培养。除了在细胞形态学上对其鉴定外,还根据成骨细胞的生物学特性,首次引用了骨形成蛋白单克隆抗体(BMP—McAb)免疫细胞化学技术,以及碱性磷酸酶染色和含量测定,成骨细胞对甲状旁腺激素(PTH)-cAMP反应等方法,验证了经酶消化分离培养的兔颅骨细胞具有成骨细胞的功能和特性。可供实验使用。