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背景和目的肺癌的发病率逐年上升,已经成为我国乃至全世界死亡率最高的恶性肿瘤。外科手术治疗是早期肺癌患者的首选治疗措施。但是大部分病人因早期症状不典型,确诊时已经属于晚期而失去手术机会。化疗和/或放疗是这类患者的首选治疗方法,但是化疗和放疗的疗效有限且常引起严重的副反应。免疫治疗能引起机体针对肿瘤的主动和被动免疫,因其潜在的抗肿瘤效应和更小的副反应而应用于临床。近年来,各种免疫治疗手段层出不穷,在临床前和临床试验中突显了明显的抗肿瘤效应。深入的机制研究是开发较为有效的免疫治疗手段的前提。肿瘤治疗的关键是选择合适的靶点。癌睾基因编码的抗原(Cancer-testis Antigen,CTA)在癌症免疫治疗领域中被广泛研究,它在部分正常组织(睾丸和胚胎组织)和各种恶性肿瘤中表达,在正常组织中不表达。黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen gene,MAGE)是CTA的一个亚家族成员,和CTA有着相同的表达模式。MAGE在肿瘤细胞的表达与肿瘤的生长、疾病的复发转移及患者的预后有关,在离体实验中通过降低肿瘤细胞自体的MAGE表达能够使肿瘤细胞的恶性生物学行为发生改变,如:降低肿瘤细胞的黏附性和迁移的能力。而且MAGE的表达情况在临床上可以用来预测多种恶性肿瘤的预后。针对家族成员例如MAGE-A3的免疫治疗可能代表对NSCLC的潜在治疗策略,并且MAGE-A3抗原特异性T细胞受体(TCR)修饰的T细胞治疗最近已显示有效杀死肺癌细胞。本研究采用实时荧光定量PCR方法对206例非小细胞肺癌组织及癌旁组织中MAGE-A3和MAGE-C2的m RNA表达情况进行了研究,并分析其表达与肺癌临床病理特征(性别、年龄、组织学分级、病理类型、淋巴结转移和分期)以及预后之间的关系;用基因沉默的方法将肺癌细胞系MAGE-A3下调,观察处理前后MAGE-A3基因表达水平的变化并探索MAGE-A3的表达对细胞生物学功能的影响。方法1、选取2014年10月至2016年05月郑州大学第一附属医院胸外科收治的非小细胞肺癌初治患者206例。所有患者在病理上被诊断为非小细胞肺癌。患者的选择标准包括进行肺癌的根治性手术,具有获得肿瘤组织的机会。所有患者签署书面知情同意书,并且患者在进行手术之前没有接受过放化疗等辅助治疗措施。用RT-PCR方法来检测肺癌组织和配对的正常组织中MAGE-A3/C2的表达,分析MAGE-A3/C2表达与临床病理参数及生物学特性的关系。收集2010年10月至2011年10月在我院胸外科住院行肺癌根治术具有完整病理资料的80例肺癌患者进行回顾性分析,术后通过电话方式随访患者的生存情况。2、合成小干扰RNA片段后转染肺癌细胞,观测转染效率,RT-PCR方法检测si RNA转染后MAGE-A3基因的表达情况,用流式细胞术、CCK8试剂盒法、细胞成球实验和transwell法检测对细胞凋亡、增殖、侵袭能力的影响。结果1.MAGE-A3和MAGE-C2在肺癌组织中高表达,在癌旁组织未检测到MAGE-A3和MAGE-C2的表达。2.MAGE-A3的表达与NSCLC患者的淋巴结转移相关,与NSCLC患者的疾病分期相关;3.MAGE-A3阳性的NSCLC患者预后较差,MAGE-A3在临床上能够作为NSCLC患者的预后指标。4.下调MAGE-A3后对肺癌细胞株的凋亡和增殖能力没有影响。5.MAGE-A3沉默后肺癌细胞株的克隆形成能力减弱,侵袭转移能力减弱,MAGE-A3能够促进肺癌细胞的上皮细胞间质化转变。结论MAGE-A3和MAGE-C2在非小细胞肺癌中有较高的阳性率,其中MAGE-A3的表达可作为一个独立的预后指标。MAGE-A3通过改变肿瘤细胞间质的上皮间质化转化使肺癌细胞的克隆形成能力和迁移能力增强。MAGE-A3可以作为肺癌的免疫治疗潜在的治疗靶点。