紫甘薯花青素是一种绿色天然色素,研究表明其在抗肿瘤、抗氧化、抗突变、保护肝脏和心脑血管等方面有多重功效和药理作用,被认为是低毒且有保健功能的一类天然化合物,而且它被称为口服的“皮肤化妆品”。目前在国内,对花青素的研究主要集中在它的来源、种类、合成途径、结构与功能以及功效和作用等方面;而国外,主要对花青素做一些生物利用度综述方面的报道,甚至研究多酚类和黄酮类峰生物利用度的文章也相当少,尤其对花青素单一成分的代谢动力学和生物利用度方面的研究则更少。究其原因,主要难点在于紫甘薯花青素属于混合成分,目前对于单一成分的分离很难得到。本论文拟对紫甘薯花青素检测分离条件进行优化以及对紫甘薯花青素的主要组分3、4、6、7号峰结构进行分析,在此基础上,通过体内吸收、代谢、排泄和Caco-2细胞跨膜转运吸收模型对其吸收与摄入转运方式进行初步研究,为紫甘薯花青素的药代动力深入研究提供帮助。1、本论文将通过高效液相色谱法(HPLC)对东北紫甘薯花青素检测条件进行确立与优化,经过多次反复实验,最终确立了紫甘薯花青素的检测条件为C相:1%磷酸/水溶液(体积比),D相:1%磷酸/35%乙腈(体积比),确立为紫甘薯花青素分离的最佳条件,此条件下分离的花青素组分多且分得开,为后续实验的顺利开展提供了有利条件。2、对紫甘薯花青素的主要组分3、4、6、7号峰结构进行紫外-可见光全波长光谱扫描和内标法定标,经过初步分析,最终确定3号峰为双糖苷双酰化结构;4号峰为双糖苷单酰化结构;6号峰为芍药花色素;7号峰为双糖苷双酰化结构。3、为了去除血清中的干扰峰,本文将通过加热法、盐析法和有机溶剂萃取法等几种方法的对比,最终经过多种方法对比显示:只有经过等体积乙腈处理后留下的杂质峰最少,适合于后续的血清中其他样品的检测。4、紫甘薯花青素的吸收(A,absorption):(1)通过灌胃低(5 mg/ml)、中(10 mg/ml)、高(20 mg/ml)三个不同浓度,检测紫甘薯花青素不同时间点血药浓度,计算其药代动力学主要参数,包括最高血药浓度、达峰时间和生物利用度,发现通过提高灌胃浓度,短时间内可以提高生物利用度,但是随着时间的推移生物利用度下降较快;而且紫甘薯花青素的生物利用度较低,均在7%以下。(2)通过Caco-2细胞单层模型的跨膜转运吸收探究紫甘薯花青素在小肠上皮细胞的转运机制,通过计算AP-BL侧和BL-AP侧的转运量进而计算表观渗透系数,研究发现不同种类的紫甘薯花青素的吸收方式均为被动转运机制。5、紫甘薯花青素的代谢(M,metabolism)用THLE-2(永生化肝细胞)细胞替代原代肝细胞,研究肝细胞水平对紫甘薯花青素的生物转化,研究发现原代肝细胞对不同浓度不同种类紫甘薯花青素的代谢不明显。6、紫甘薯花青素的排泄(E,excretion)小鼠灌胃紫甘薯花青素后不同成分不同浓度在不同时间点尿液中排泄研究,研究发现不同种类紫甘薯花青素均在2 h内尿液中累积量达到最大值,12 h后才能完成紫甘薯花青素体内排泄(6号峰除外)。