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本文比较了黄芩苷和黄芩苷铜对人肝癌细胞(HepG-2)裸鼠移植瘤生长的影响,并采用免疫印迹分析癌细胞凋亡相关蛋白的表达以研究黄芩苷铜对人肝癌细胞株HepG-2增殖、凋亡的影响,初步探讨其作用机制。构建HepG-2细胞裸鼠异种移植瘤模型,分析黄芩苷铜对人肝癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用。将裸鼠随机分为4组：对照组、50mg/kg黄芩苷组、50mg/kg黄芩苷铜组、100mg/kg黄芩苷铜组。各组每天肌肉注射给药相应剂量并测量绘制肿瘤的生长曲线,32天后处死动物,称重瘤块和计算抑瘤率以评价黄芩苷铜和黄芩苷处理对HepG-2细胞裸鼠异种移植瘤的影响。利用MTT法分析黄芩苷铜对于HepG-2细胞增殖的抑制作用。采用AO染色及荧光显微镜观察经黄芩苷铜作用后,人肝癌HepG-2细胞中凋亡肝癌细胞的形态学变化。利用流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡率。采用PI单染流式细胞仪分析细胞周期的分布,观察黄芩苷铜对HepG-2细胞的诱导凋亡作用；采用Western blot分析黄芩苷铜对PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白、caspase-3、Bax、p38、和Bcl-2蛋白表达的影响。肌肉注射黄芩苷和黄芩苷铜32天后,黄芩苷剂量为50mg/kg、黄芩苷铜剂量为50mg/kg和100mg/kg时,瘤块重量分别为0.69±0.11g,0.6±0.17g和0.40±0.07g均明显低于对照组(P<0.05)；对HepG-2裸鼠异种移植瘤的抑制率分别为31.7%、44.9%和65.5%。MTT实验结果表明,给予不同浓度的黄芩苷铜HepG-2细胞48h后,黄芩苷铜可以明显抑制HepG-2细胞的增殖,且呈剂量依赖性。使用AO染色观察细胞形态学变化,黄芩苷铜作用肝癌细胞后,细胞中出现细胞核固缩、核裂解、染色质聚集等细胞形态改变。Annexin V/PI双染流式结果表明黄芩苷铜作用HepG-2细胞后,黄芩苷组的细胞凋亡率和对照组的比较有显著性的升高,表明黄芩苷铜可以诱导HepG-2细胞凋亡。流式细胞分析细胞周期结果显示,黄芩苷铜可将肝癌的细胞周期阻滞在G2/M期,同时G0/G1期细胞减少,G2/M期的细胞增多,但S期细胞无明显变化。Western blot分析细胞凋亡相关蛋白的实验结果表明黄芩苷铜能下调p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的表达、下调casepase、p38、抑制凋亡因子Bcl-2表达的下调并上调Bax蛋白表达。荷瘤实验表明,黄芩苷铜可抑制HepG-2细胞裸鼠异种移植瘤的生长。细胞实验结果也表明,黄芩苷铜能抑制HepG-2细胞的增殖,同时诱导肝癌细胞凋亡和阻滞肝癌细胞周期。免疫印迹分析法分析细胞相关凋亡蛋白的结果表明,其作用机制可能与下调PI3K/Akt/mTOR信号通路、下调casepase、p38和Bcl-2、上调Bax蛋白表达。