双向发酵是以药用真菌作为发酵菌种,中药材作为药性基质替代传统的甘蔗渣、麦麸等营养基质进行发酵,发酵过程中药性基质为真菌的生长提供碳源、氮源等营养成分,而真菌生长代谢又作用于药性基质,使其朝向活性更强、毒性更低或生物利用度更高的方向转化。发酵所得产品为药性菌质,药用真菌与中药协同发挥药效。乳腺癌是危害女性健康的恶性肿瘤之一。近年来,乳腺癌的发病率正在上升。目前,乳腺癌有效的治疗方法大多是手术治疗,术前或术后辅助放疗、化疗或免疫治疗。许多化疗药物能有效地杀灭肿瘤细胞,但它们的毒副作用和许多耐药性限制了临床使用。因此,如何解决乳腺癌的临床治疗问题,以及相关基础研究,人们开始高度重视这些问题。本文是在课题组前期研究的基础上,对槐耳板蓝根菌质提取物抗乳腺癌作用及作用机制进行更加深入的研究。以药效为评价指标,不仅为确定槐耳板蓝根菌质是否有抗乳腺癌作用以及是否比单独的槐耳和板蓝根更有优势提供科学数据,而且也能为中药配伍理论以及作为现代炮制方法的生物发酵技术的科学性提供更多的数据支持。本文的主要研究内容如下:（1）采用槐耳对板蓝根进行发酵,以70%乙醇对槐耳板蓝根药用菌质进行提取,得槐耳板蓝根双向发酵提取物,将其作用于3株雌激素表达类型不同的乳腺癌细胞,考察槐耳板蓝根双向发酵提取物对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。结果显示:槐耳生长状况良好;槐耳板蓝根双向发酵提取物可以明显抑制细胞的增殖,且存在剂量、时间效应关系。与板蓝根和槐耳相比,槐耳板蓝根双向发酵提取物对细胞的抑制作用更好。槐耳板蓝根双向发酵提取物可以阻滞细胞周期,诱导3株乳腺癌细胞凋亡。（2）考察槐耳板蓝根双向发酵提取物对乳腺癌细胞转移和侵袭的影响。细胞划痕实验、Transwell小室体外侵袭实验和细胞黏附实验结果显示,槐耳板蓝根双向发酵提取物可显著抑制细胞愈合及其穿过基质膜的数量和细胞贴壁能力,表明槐耳板蓝根双向发酵提取物抑制乳腺癌细胞的迁移和侵袭能力强于槐耳和板蓝根、二者配伍双向发酵具有更好的抗肿瘤细胞转移侵袭的药效作用。槐耳板蓝根双向发酵提取物可能通过抑制MMP-9等基因表达抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭能力。（3）研究槐耳板蓝根双向发酵提取物对4T1小鼠乳腺癌移植瘤的抑制作用。结果显示:槐耳板蓝根双向发酵提取物可以明显抑制肿瘤生长且对小鼠免疫系统具有保护作用。