论文部分内容阅读
目的:探讨Q808对癫痫大鼠海马神经炎症的影响，为临床应用Q808治疗小儿癫痫提供参考依据。
方法:选取6-8周健康雄性SD大鼠60只，随机分为正常对照组(n=10)，实验组50只。实验组大鼠用氯化锂-匹罗卡品处理，建立颞叶癫痫模型，按Racine分类达到Ⅳ级或Ⅴ级癫痫大鼠发作约40分钟确定为造模成功，造模成功的42只大鼠进一步分为癫痫(TLE)组(n=10)、Q808组(n=11)、丙戊酸钠(VPA)组(n=11)和Q808+VPA组(n=10)。Q808组和VPA组分别灌胃Q808(80mg/kg)和VPA(180mg/kg)，Q808+VPA组同时灌胃Q808(40mg/kg)和VPA(90mg/kg)，TLE组和正常组同时灌胃生理盐水，每日1次共28天，将大鼠断头并取出海马组织。应用H-E染色观察大鼠海马神经元的形病理变化，应用免疫组化染色观察各组大鼠海马组织内NF-κB的表达和分布，应用Westernblot检测观察各组大鼠海马组织内IL-1β、TNF-α和NF-κB的表达。
结果:
1.Westernblot:与正常组相比，TLE组，Q808与VPA组大鼠海马IL-1β的表达均明显升高(P＜0.01)，而Q808+VPA组IL-1β表达无明显差异。与TLE组相比，Q808组、VPA组和Q808+VPA组IL-1β表达均显著降低(均P＜0.05)。Q808+VPA组与Q808组和VPA组相比IL-1β的表达明显降低(P＜0.05)。Q808组与VPA组IL-1β表达略有差异，但无统计学意义。
与正常对照组相比，TLE组海马中TNF-α表达显著增加(P＜0.01)，Q808和VPA组的TNF-α也明显升高(P＜0.05)，而Q808+VPA组无明显差异(P＞0.05)。与TLE组相比，Q808和VPA组TNF-α表达明显降低(P＜0.05)，而Q808+VPA组TNF-α表达降低最明显(P＜0.01)。VPA组与Q808组相比TNF-α的表达无显着差异，而Q808+VPA组与Q808和VPA组相比TNF-α的表达明显降低(P＜0.05)。
与正常对照组比较，TLE组大鼠海马NF-κB表达显著升高(P＜0.01)，Q808组、VPA组、Q808+VPA组NF-κB表达亦明显升高(均P＜0.05)。与TLE组相比，Q808组与VPA组中NF-κB的表达均明显降低(P＜0.05)，Q808+VPA组降低更显著(P＜0.01);VPA组和Q808组之间无显著性差异。与VPA组相比，Q808+VPA组NF-κB表达明显降低(P＜0.05)。与Q808组相比，Q808+VPA组NF-κB表达降低显着(P＜0.01)。
2.病理学观察结果:
H-E染色:正常对照组细胞数量较多，大小及形态规则，排列有序。
TLE组、Q808组、VPA组和Q808+VPA组海马DG区颗粒细胞和CA1区小锥体细胞、CA3区大锥体细胞数量减少，形态不规则，排列紊乱，部分细胞空泡状改变。与TLE组相比，全部药物干预组细胞形态明显改善，Q808+VPA组细胞形态改善优于Q808组和VPA组。
3.免疫组化:与正常对照组相比，TLE组和Q808组NF-κB蛋白表达显著增高(均P＜0.01)，VPA组NF-κB蛋白表达明显增高(P＜0.05)。
与TLE组相比，Q808组和VPA组NF-κB蛋白表达明显降低(P＜0.05)，而Q808+VPA组NF-κB蛋白表达显著降低(P＜0.01)。
与Q808组和VPA组相比，Q808+VPA组NF-κB蛋白表达明显降低(P＜0.05)。
结论:
1.Q808可改善氯化锂-匹罗卡品引起的癫痫大鼠海马的病理改变。
2.Q808部分下调TLE中海马的炎症因子IL-1β、TNF-α和NF-κB的表达，提示Q808可能抑制癫痫大鼠海马中的炎症级联反应。
3.Q808和VPA的联合组在癫痫大鼠炎症因子的表达较其他组更低，表明Q808和VPA可能通过不同的信号通路发挥协同作用。
方法:选取6-8周健康雄性SD大鼠60只，随机分为正常对照组(n=10)，实验组50只。实验组大鼠用氯化锂-匹罗卡品处理，建立颞叶癫痫模型，按Racine分类达到Ⅳ级或Ⅴ级癫痫大鼠发作约40分钟确定为造模成功，造模成功的42只大鼠进一步分为癫痫(TLE)组(n=10)、Q808组(n=11)、丙戊酸钠(VPA)组(n=11)和Q808+VPA组(n=10)。Q808组和VPA组分别灌胃Q808(80mg/kg)和VPA(180mg/kg)，Q808+VPA组同时灌胃Q808(40mg/kg)和VPA(90mg/kg)，TLE组和正常组同时灌胃生理盐水，每日1次共28天，将大鼠断头并取出海马组织。应用H-E染色观察大鼠海马神经元的形病理变化，应用免疫组化染色观察各组大鼠海马组织内NF-κB的表达和分布，应用Westernblot检测观察各组大鼠海马组织内IL-1β、TNF-α和NF-κB的表达。
结果:
1.Westernblot:与正常组相比，TLE组，Q808与VPA组大鼠海马IL-1β的表达均明显升高(P＜0.01)，而Q808+VPA组IL-1β表达无明显差异。与TLE组相比，Q808组、VPA组和Q808+VPA组IL-1β表达均显著降低(均P＜0.05)。Q808+VPA组与Q808组和VPA组相比IL-1β的表达明显降低(P＜0.05)。Q808组与VPA组IL-1β表达略有差异，但无统计学意义。
与正常对照组相比，TLE组海马中TNF-α表达显著增加(P＜0.01)，Q808和VPA组的TNF-α也明显升高(P＜0.05)，而Q808+VPA组无明显差异(P＞0.05)。与TLE组相比，Q808和VPA组TNF-α表达明显降低(P＜0.05)，而Q808+VPA组TNF-α表达降低最明显(P＜0.01)。VPA组与Q808组相比TNF-α的表达无显着差异，而Q808+VPA组与Q808和VPA组相比TNF-α的表达明显降低(P＜0.05)。
与正常对照组比较，TLE组大鼠海马NF-κB表达显著升高(P＜0.01)，Q808组、VPA组、Q808+VPA组NF-κB表达亦明显升高(均P＜0.05)。与TLE组相比，Q808组与VPA组中NF-κB的表达均明显降低(P＜0.05)，Q808+VPA组降低更显著(P＜0.01);VPA组和Q808组之间无显著性差异。与VPA组相比，Q808+VPA组NF-κB表达明显降低(P＜0.05)。与Q808组相比，Q808+VPA组NF-κB表达降低显着(P＜0.01)。
2.病理学观察结果:
H-E染色:正常对照组细胞数量较多，大小及形态规则，排列有序。
TLE组、Q808组、VPA组和Q808+VPA组海马DG区颗粒细胞和CA1区小锥体细胞、CA3区大锥体细胞数量减少，形态不规则，排列紊乱，部分细胞空泡状改变。与TLE组相比，全部药物干预组细胞形态明显改善，Q808+VPA组细胞形态改善优于Q808组和VPA组。
3.免疫组化:与正常对照组相比，TLE组和Q808组NF-κB蛋白表达显著增高(均P＜0.01)，VPA组NF-κB蛋白表达明显增高(P＜0.05)。
与TLE组相比，Q808组和VPA组NF-κB蛋白表达明显降低(P＜0.05)，而Q808+VPA组NF-κB蛋白表达显著降低(P＜0.01)。
与Q808组和VPA组相比，Q808+VPA组NF-κB蛋白表达明显降低(P＜0.05)。
结论:
1.Q808可改善氯化锂-匹罗卡品引起的癫痫大鼠海马的病理改变。
2.Q808部分下调TLE中海马的炎症因子IL-1β、TNF-α和NF-κB的表达，提示Q808可能抑制癫痫大鼠海马中的炎症级联反应。
3.Q808和VPA的联合组在癫痫大鼠炎症因子的表达较其他组更低，表明Q808和VPA可能通过不同的信号通路发挥协同作用。