目的:近年来,2型糖尿病患病率逐年上升,其多种慢性并发症严重威胁着生命健康,血管病变是糖尿病慢性并发症共同的病理基础和核心环节。随着对糖尿病发病机制研究的深入,黏附分子在其血管并发症发病过程中所起的作用,越来越受到重视。L-选择素是细胞黏附分子选择素家族的重要成员。近年的研究证实,L-选择素通过促进白细胞与血小板和内皮细胞的黏附造成内皮损伤和血管内微血栓形成,在糖尿病大血管病变、微血管病变的发生发展过程中具有重要作用。但L-选择素在糖尿病病程中的变化及影响因素未见报道。本试验通过复制2型糖尿病大鼠模型,检测不同病程糖尿病大鼠血清可溶性L-选择素(sL-selectin)、血脂和糖化血红蛋白的变化,探讨L-选择素的动态变化规律,血脂、糖化血红蛋白与可溶性L-选择素的关系,为临床早期发现、治疗糖尿病慢性并发症提供理论依据。方法:健康7周龄清洁级近交系wistar大鼠120只,体重180-220g,雌雄各半,适应性饲养一周,随机分为两组:正常组(control group, CON)50只,试验组(trial group ,TRI)70只,雌雄各半。正常组动物喂养普通饲料:蛋白质占23%,碳水化合物占50%,脂肪占5%,其他22%;试验组动物喂养高脂高糖饲料(由基础饲料加蔗糖、炼猪油、鸡蛋混合而成),蛋白质占15%,碳水化合物占51%,脂肪占25%,其他9%,使其产生胰岛素抵抗。4周后试验组大鼠腹腔注射25mg/kg链脲佐菌素(STZ)(以PH4.4的0.1mmol/l柠檬酸钠缓冲液配制成1%浓度),正常组大鼠腹腔注射等体积的0.1mmol/L无菌柠檬酸缓冲液,每周一次,连续两周。两周后给所有动物行葡萄糖耐量试验(大鼠禁食12小时后尾静脉取血测空腹血糖,按2g/kg体重灌胃50%葡萄糖溶液,2h后尾静脉取血测2h血糖),空腹血糖≥7.0mmol/L,和(或)葡萄糖负荷后2小时血糖≥11.1mmol/L为造模成功。从造模成功者随机选取大鼠50只(雌雄各半)纳入正式试验,作为糖尿病组(diabetes group,DIA)。于0周,4周,8周,12周,16周时,分别从正常组与糖尿病组中随机选取10只(雌雄各半)处死,取血测定观测值。对照组一直喂普通饲料,糖尿病组继续喂高脂高糖饲料,每2周测空腹血糖(均为禁食10-12小时,尾静脉取血)和体重。于试验第0、4、8、12、16周末禁食10-12小时,1%水合氯醛腹腔注射麻醉,下腔静脉取血5-7ml注入普通试管,室温下静置1小时,血液自然凝固,3000转/分离心10分钟,取上清液,-80℃冰箱保存。待标本收集齐全后同批采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定可溶性L-选择素(sL-selectin),采用全自动生化分析仪检测血脂,并于相应时段尾静脉取血测定糖化血红蛋白(HbA1c%)。所有数据采用SAS6.10软件进行统计,计数资料采用均数±标准差表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用完全随机设计的单因素方差分析和Q检验,两变量间线性关系采用直线相关分析,P≤0.05为有统计学意义。结果:1试验过程中,无一例动物死亡。成模前正常组大鼠随年龄增长,体重稳定增加,血糖及糖化血红蛋白均在正常范围;试验组大鼠体重增长较正常组快,但无统计学意义,血糖亦在正常范围。2正式试验后正常组大鼠随年龄增长,血糖稳定,均在正常范围,各时间段之间无明显差别,高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、糖化血红蛋白、可溶性L-选择素均无明显变化;糖尿病组大鼠随着病程的延长,血糖处于较高水平,无明显增高或降低,各时间段之间无明显差别(P>0.05);两组大鼠的起始体重没有变化,试验期间,体重随着时间的延伸规律性的增加,糖尿病组大鼠成模后体重增加较快,从第三周起,与正常组大鼠比较出现差异,差异逐渐增大直到实验结束(p<0.01)。3糖尿病组大鼠0周时可溶性L-选择素浓度与正常组相比较,有统计学意义(p<0.01)。随着糖尿病病程的延长,可溶性L-选择素浓度持续升高,与同时间段正常组相比较,有统计学意义, 4周,8周,12周,16周之间的可溶性L-选择素浓度没有明显差别(P>0.05),但与0周时相比较,差别明显(P<0.01)。4随着糖尿病病程延长,糖尿病组大鼠低密度脂蛋白胆固醇逐渐增高,高密度脂蛋白胆固醇逐渐降低,与同时间段正常组相比,有统计学差异(P<0.01)。5糖尿病组大鼠低密度脂蛋白胆固醇与可溶性L-选择素呈正相关,高密度脂蛋白胆固醇与可溶性L-选择素呈负相关;糖化血红蛋白与可溶性L--选择素呈正相关。结论:本试验研究结果显示2型糖尿病大鼠血清可溶性L-选择素与正常组相比较,统计学意义显著,随着糖尿病病程的延长,可溶性L-选择素持续升高。通过监测2型糖尿病大鼠糖化血红蛋白及低密度脂蛋白、高密度脂蛋白胆固醇,发现HbA1c、LDL-C与sL-selectin呈正相关,HDL-C与sL-selectin成负相关。白细胞表面L-选择素表达增加是白细胞激活的标志,而白细胞激活参与糖尿病血管病变的发生、发展。因此,检测sL-selectin可作为糖尿病慢性并发症的监测指标。同时,LDL-C、HDL- C与HbA1c密切相关,糖化血红蛋白可使体内的糖基化产物增多,高浓度的血糖自氧化产生大量氧自由基,刺激白细胞和血管内皮细胞释放一些细胞因子,诱导白细胞表达释放L-selectin。因此,研究L-selectin、血脂及糖化血红蛋白这三者的相互关系,可以进一步阐述糖尿病慢性并发症发生的机理,为有效的预防其发生提供有益的线索。