人退变腰椎间盘组织中p53与IL-1β、IL-6表达的实验研究

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目的:研究表明椎间盘退变与椎间盘细胞老化以及老化细胞分泌的炎性因子密切相关,本实验通过检测p53和白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)在退变与正常的腰椎间盘髓核组织中的表达,比较两组的表达水平,分析p53与IL-1β、IL-6表达的相关性,以及椎间盘退变等级与p53、IL-1β、IL-6表达的相关性。探讨p53、IL-1β、IL-6在椎间盘退变中的作用及意义。方法:收集40例腰椎间盘突出症患者的椎间盘髓核组织,其中男22例,女18例,突出部位L4/5,术后病理证实为退变椎间盘髓核组织,并纳入退变组。另取20例腰椎爆裂型骨折手术患者受累椎间盘髓核组织,其中男14例,女6例,受累部位L4/5,术后病理证实为正常椎间盘髓核组织,并纳入正常组。将髓核根据Thompson分级分为五级。应用免疫组织化学方法检测髓核标本中p53与IL-1β、IL-6的表达。分别记录三者的细胞染色阳性率并进行分级,采用X2检验方法(chi-square test)对三者在退变组与正常组的细胞染色阳性率进行比较,同时采用spearman等级相关分析方法分析椎间盘退变等级与p53、IL-1β、IL-6表达的相关性。应用Western-Blot技术检测髓核标本中p53与IL-1β、IL-6的表达,两组之间采用独立样本t检验进行比较,同时采用spearman等级相关分析方法分析p53分别与IL-1β、IL-6表达的相关性。结果:1、免疫组织化学方法检测结果:退变组中40例髓核P53、IL-1β、IL-6染色阳性率分别为80.0%(32/40)、87.5%(35/40)和72.5%(29/40),正常组中p53、IL-1β、IL-6染色阳性率分别为10%(2/20)、20%(4/20)和15%(3/20),p53、IL-1β、IL-6分别在两组之间的表达差异有显著意义(p<0.001)。椎间盘退变等级分别与p53、IL-1β、IL-6量的表达正相关(相关系数分别为rs=0.616,p<0.001,显著相关;rs=0.673,p<0.001,显著相关;rs=0.654,p<0.001,显著相关)。2、Western Blot结果表明退变组中p53与IL-1β、IL-6蛋白表达量相对于正常组均有明显增加,两组中p53与IL-1β、IL-6灰度比值有统计学差异(P<0.05)。p53分别与IL-1β、IL-6的表达呈正相关,p53与IL-1β与的相关系数为rs=0.466,p=0.003,中度相关;p53与IL-6的相关系数为rs=0.447,p=0.004,中度相关。IL-1p与IL-6的表达无相关性,其相关系数分别为rs=0.113,p=0.512。结论:1、p53与IL-1β、IL-6在椎间盘退变过程中表达增高,三者与椎间盘退变过程关系密切。2、p53、IL-1β、IL-6与椎间盘退变等级之间存在正相关,三者是导致椎间盘退变的重要原因。3、p53与IL-1β、IL-6之间存在正相关性,p53在椎间盘退变过程中发挥作用与IL-1β、IL-6有关。
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