bta-miR-484对牛脂肪细胞分化的影响

来源 :宁夏大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yilvQINGFENG
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牛肉品质直接影响牛肉经济价值,肌内脂肪含量是影响肉品质的关键因素之一,挖掘出牛脂肪生成过程中的重要调控因子,可提高牛肌内脂肪沉积水平,并为肉品质改良提供重要理论依据。miRNA是基因表达调控研究的热点之一,参与动物肌肉发育和脂肪形成等多个生物学过程。本研究通过RT-qPCR鉴定、细胞诱导分化、基因过表达/抑制等技术探究miR-484对牛脂肪沉积过程中的作用。主要研究结果如下:(1)利用生物信息软件得到预测得到550个bta-miR-484候选靶基因,最终筛选出11个可能和bta-miR-484具有靶向结合关系的基因。经双荧光素酶活性报告分析发现,基因NCOR1、IFITM1、HTT、HMGCR和 bta-miR-484 不具有靶向结合关系。(2)bta-miR-484在牛心脏中表达量极显著高于其他组织(P<0.01);在肌肉中的表达量显著高于背脂、脾脏、肝脏(P<0.05),且极显著高于肾脏、肺脏(P<0.01);在背脂和脾脏、肝脏之间的表达量无显著差异;在肾脏和肺脏中表达量低,两者之间不存在显著差异。(3)随着原代脂肪细胞诱导时间的增加,bta-miR-484的表达呈先上升后下降的趋势,自诱导2d起bta-miR-484的表达量均高于0d(P<0.01),且4d时bta-miR-484的表达量极显著高于0d(P<0.01)。(4)相比对照组,过表达bta-miR-484后,牛原代脂肪细胞的脂质积累减少(P<0.05),成脂标志基因PPARγ、FABP4、C/EBPA的表达量下降(P<0.05);抑制bta-miR-484后,牛原代脂肪细胞的脂质积累增加(P<0.05),成脂标志基因PPARγ、FABP4、C/EBPA的表达量升高(P<0.05)。综上所述,本研究结果显示NCOR1、IFITM1、HTT、HMGCR与bta-miR-484不具备靶向结合关系;bta-miR-484在脂肪组织中的表达量低于心脏和肌肉,但高于肺和肾;成脂分化过程中的bta-miR-484表达呈先上升后下降的趋势;过表达bta-miR-484可抑制牛原代脂肪细胞脂质积累,抑制bta-miR-484会促进牛原代脂肪细胞脂质积累。本研究结果表明bta-miR-484负向调节脂肪细胞分化过程,为进一步探究bta-miR-484调控牛脂肪沉积的作用机制提供了基础。
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