论文部分内容阅读
近年来,大肠杆菌作为一种模式生物被广泛应用于各种功能化合物的生产,氨基酸因其具有广泛的药用价值而备受关注。本文利用合成生物学手段,在大肠杆菌中引入L-2,3-二氨基丙酸外源路径,首次实现了其生物合成,具体工作如下:1、设计了三条外源合成路径,将外源基因连接到pETDuet-1载体上,以BL21 (DE3)为外源酶表达宿主。通过镍柱纯化得到三组外源酶,进行体外酶活测试。三组外源酶中,来源于金黄色葡萄球的SbnA,SbnB能够以谷氨酸和磷酸丝氨酸为底物,将其转化为目的产物L-DAP,另外两组酶并无活性。