论文部分内容阅读
目的 通过分别检测大鼠和人原发性肝细胞肝癌(heatocellular carcinoma,HCC)组织和血清中的非编码RNA(200a,miRNA 122,miRNA 125,miRNA 10b,miRNA 21,miRNA 92b,lncRNA HOTAIR,lncRNA DANCR,lncRNA HOTTIP和lncRNA TCF7)的表达情况,探讨非编码RNA组合在HCC中的早期预判价值。方法 在大鼠中用二乙基亚硝胺诱导HCC,并且使用基于组织学检查的评分系统在大鼠HCC发展中鉴定了6个不同阶段(正常肝脏,肝脏变性,肝纤维化,肝硬化,早期HCC和晚期HCC)。在这六个阶段的组织和血液样品中检测AFP和miRNA(miRNA 10b,miRNA 21,miRNA 122和miRNA 200a)的表达水平。采用受试者工作特征曲线(receive operating characteristic curve,ROC)分析评价各参数及其不同组合在诊断HCC中的功效。采集我院28例HCC患者和12例肝血管瘤患者作为对照组的肝脏组织和外周血。通过Real-time PCR法检测六个miRNAs(miRNA 200a,miRNA 122,miRNA 125,miRNA10b,miRNA 21和miRNA 92b)和四个lncRNAs(lncRNA HOTAIR,lncRNA DANCR,lncRNA HOTTIP和lncRNA TCF7)在肝脏组织和血清中的表达情况。采用ROC曲线评价血清中单一标志物和联合标志物用于HCC诊断时的效能。结果 在大鼠HCC进展过程的早期阶段,miRNA 200a,miRNA 122,miRNA 10b,miRNA21四种miRNAs的表达水平即发生显著变化,比AFP变化开始时间更早(P<0.05)。在肝纤维化阶段,血清miRNA 10b的表达水平即发生显著升高(P<0.05)。在肝硬化阶段,血清中miRNA 21表达水平发生显著升高(P<0.05);血清中miRNA 200a和血清中miRNA 122的表达水平发生显著降低(P<0.05)。联合血清中四种miRNAs在预测HCC方面比单独使用AFP诊断具有更强的效能。HCC患者癌组织中miRNA 10b,miRNA 21,lncRNA DANCR和lncRNA TCF7的相对表达量显著高于肝血管瘤患者(P<0.05),而HCC患者癌组织中miR-122的相对表达量显著低于肝血管瘤患者(P<0.05)。然而,miRNA 200a,miRNA 125,miRNA 92b,lncRNA HOTAIR,lncRNA HOTTIP在HCC患者癌组织和对照组肝脏组织中的相对表达量则无明显差别。HCC患者血清中miRNA 122,miRNA 125的相对表达量显著低于对照组(P<0.05),miRNA 10b,miRNA 21,miRNA 92b的相对表达量则显著高于对照组(P<0.05)。HCC患者血清中lncRNA DANCR和lncRNA HOTTIP的表达量极显著高于正常对照组(P<0.01)。ROC分析显示,联合miRNA 125,miRNA 10b和lncRNA HOTTIP均阳性表达且相较所选十种标志物中任意一种或者任何组合方式具有更大的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.994(95%CI:0.978-1.000)。结论 血清中联合非编码RNA有望成为HCC早期筛查诊断的生物标志物。